Кількісний аналіз на гепатит С: розшифровка, норма,

1. Що таке ПЛР?
2. Види методу ПЛР
3. Особливості кількісного ПЛР аналізу
4. показання
5. Для чого проводиться на різних етапах перебігу хвороби?
6. розшифровка
7. Норма кількісного аналізу на гепатит С
8. відхилення
9. плюси методу

Гепатит С - це одне з найнебезпечніших і важко діагностуються вірусних захворювань. Для визначення хвороби використовують метод ПЛР гепатиту С. Це нова високотехнологічна методика, що дозволяє досліджувати генетичний матеріал на існування життя в найдрібніших частинках (молекулах) і менших кількостях. Вірус гепатиту дуже стійкий, він здатний довго жити в навколишньому середовищі і відмінно приживається в організмі людини.

Що таке ПЛР?

Нині існує величезна кількість самих різних хвороб. І не менша кількість методів їх визначення. Так як агенти інфекцій навчилися з легкістю приживатися в навколишньому середовищі і еволюціонувати, то щоб їх діагностувати, застосовуються новітні технології. Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) - це більш швидкий і точний метод, що спрямований на пошук збудника захворювання, шляхом суттєвого підвищення частки ДНК вірусу гепатиту в зразку. Про нього часто пишуть: шукає голку в копиці сіна, а потім з голок будує стіг.

Види методу ПЛР

Якісне тестування допоможе визначити присутність вірусу гепатиту С в організмі.

Виділяють якісний і кількісний аналіз на гепатит. Щоб визначити, чи знаходиться вірус в організмі, і тим, у кого знайшли антитіла до гепатиту С, проводять якісне тестування. Розшифровка аналізу видає підсумок: «позитивно»; «Негативно». Негативне значення означає: або людина здорова, або агентів в крові ще недостатньо і їх неможливо знайти. Тому варто провести повторне дослідження через деякий час.

Позитивний результат говорить про існування інфекції. Це практично завжди точне значення. Помилкові результати залежать зазвичай від людського фактора (неправильне зберігання або недотримання правил проведення методики). Коли норма, підсумок - негативний. Перед проведенням тестування особливих правил немає, просто беруть кров з вени.

Якщо знайшли, проводять кількісний аналіз (вірусне навантаження) - він дає числові значення: скільки РНК вірусу гепатиту знаходиться на даний час в установленому обсязі досліджуваного матеріалу. При активному розвитку інфекції її можна виявити на 1-2 тижні у зараженої людини. Зазвичай досліджують також кров, тому що агенти в ній вільно циркулюють.

Особливості кількісного ПЛР аналізу

Кількісний ПЛР допоможе підібрати найбільш ефективне лікування гепатиту С.

Відмінністю кількісного аналізу є те, що не всі його проходять. Якісний - визначає наявність, а кількісний - допомагає з підтвердженням укладення «вірус гепатиту», прогнозом перебігу хвороби і визначення ходу лікування. Наскільки ефективна терапія, дивляться по числу РНК до і під час лікування. Також з його допомогою визначають призначення доз препаратів.

показання

Як правило, його проводять до початку лікування. Основними показаннями можуть бути:

• визначення вірусного навантаження та контроль за антивірусної терапією;
• якісний ПЛР знайшов антитіла гепатиту С;
• знаходження гострого і хронічного гепатиту С;
• існування мікст-гепатитів;
• при плануванні лікування;
• якщо якісне дослідження ще знаходить присутність хвороби після дванадцятого тижня терапії.

Також дивляться, яка вірусне навантаження при гепатиті: низька - терапія проводиться успішно; підвищена - лікування неефективне і його потрібно міняти.

Для чого проводиться на різних етапах перебігу хвороби?

Аналіз допоможе контролювати результати терапії на всіх стадіях лікування.

На різних фазах захворювання дослідження проводять, щоб дати рецензію користі лікування та планування терміну його подальшого проведення. При хороших відповідях на терапію термін її скорочують. В іншому випадку, при повільному догляді вірусу, курс лікування продовжують. ПЛР на гепатит роблять на 1,4, 12, 24 тижні терапії. Коли показники не падають після закінчення 12 тижнів, то роблять висновок, що терапія не підходить цьому організму. Цей аналіз використовують для встановлення, наскільки активна інфекція і яка ймовірність її передати. Наприклад, при вагітності є ризик заразити малюка. Після терапії виявляють ризик відновлення хвороби.

розшифровка

Після проведення дослідження розшифрувати аналіз можуть не в цифрах, а словами: «нижче діапазону вимірювань» і «не виявлено». Кількісний ПЛР більш чутливий якісного. Висновок «не виявлено» може говорити, що інфекція не знайдено. «Нижче діапазону вимірювань» - випробування не знайшло вірус, але він є в малій величині. У цій ситуації роблять повторне дослідження.

Вірусне навантаження - визначення числа інфекційного РНК в установленому обсязі крові (кількісно 1 мл = 1куб.сан). Формулюється в інтернаціональних вимірах МО / мл. Окремі лабораторії позначають копії / мл. Розшифрувати переклад компонентів в міжнаціональні значення різні тест-системи можуть по-своєму. Таблиця 1. Розшифровка кількісного аналізу РНК вірусу

Цифрове позначення числа вірусу, МО / мл Опис результату Чи не виявлено Норма для здорової людини. Вірус не найден або результат нижче межі чутливості методики. До 1.8 * 10 ^ 2 Виявлено в концентрації нижче ліній кордону. До 8 * 10 ^ 5 Виявлено вірус при хорошому прогнозі хвороби і ефективному лікуванні. Низьке вірусне навантаження. Більше 8 * 10 ^ 5 Виявлено вірус і велика вірусне навантаження. Більше 2,4 * 10 ^ 7 Виявлено вірус в концентрації вище лінійного діапазону.

Норма кількісного аналізу на гепатит С

Коли людина здорова, норма є - «не виявлено». У хворих людей нормою буде зниження дози вірусу в результатах на логарифмічну одиницю, що проявляється спадання числа нулів в аналізі на один (наприклад, з 1 * 106 МО / мл до 1 * 105 МО / мл). Рамки діапазону концентрації вірусу, що визначає ампліфікатор, знаходяться в межах 1,8 * 102 - 2,4 * 107 МО / мл. Трактування результату:

• низька концентрація - від 600 МО / мл до 3 * 104 МО / мл;
• середня - від 3 * 104 МО / мл до 8 * 105 МО / мл;
• висока - вище 8 * 105 МО / мл.

відхилення

Для визначення ступеня ураження печінки призначають біопсію.

При змінах результатів аналізів поза нормою, це може свідчити про повернення хвороби і розмноженні вірусу. На отримання недостовірного результату можуть вплинути окремі чинники, наприклад, забруднення зразків; присутність в крові гепарину і речовин, що уповільнюють дію компонентів ПЛР; помилки лабораторій; недотримання правил проведення тесту.

Також результат в декількох лабораторіях може відрізнятися, можливо, була інша методика проведення досліджень. Щоб дізнатися, наскільки вражена печінка і небезпека хвороби, недостатньо провести кількісний ПЛР гепатиту. Додатково проходять біохімічні процедури і біопсію.

Плануючи лікування, проводять генотипування вірусу. У зв'язку з тим, що гепатит С здатний змінюватися, існує кілька груп. Для різних типів лікування може відрізнятися. Бувають ситуації, коли присутні кілька видів, але аналіз знаходить один, той, що переважає. Тоді тест перездають.

плюси методу

Методика ПЛР дає можливість надати висновок і призначити правильне лікування. Плюси методики:

• Швидкість результатів - не вимагає розмежування і вирощування видів збудника. Автоматизація процесу дозволяє обробляти і вивчати матеріал з отриманням результату за 4-5 годин.
• Прямота визначення збудника - знайшовши особливу частину ДНК, прямо вказує на наявність недуги. Наприклад, ІФА - знаходить білки-маркери (продукти життєдіяльності бактерій), що не дає точного підтвердження наявності хвороби.
• Специфічність - досліджується речовина, характерне тільки для конкретного збудника, що виключає реакцію на помилкові спільно-реагують агенти.
• Сприйнятливість - може виявити найменшу кількість віруОпісаніе ітогаса.
• Універсальність - грунтується на знаходженні фрагментів ДНК або РНК конкретних організмів. Це дає можливість провести діагностику для будь-яких агентів з одного біоматеріалу, якщо інші методи безсилі.
• Виявляє не тільки явні, але і приховані інфекції - ефективний для вивчення агентів важко вирощуваних, що не вирощуються, стійких.
• https://www.youtube.com/watch?v=lBi-d6jAKxQ

За допомогою цього дослідження провести діагностику можуть кожному для засвідчення факту відсутності хвороби. Але для достовірних фактів потрібно чітко дотримуватися інструкції. ПЛР використовують в різних галузях: криміналістиці, для встановлення батьківства, для діагностування різних вірусів, для виявлення алергії на ліки, клонування генів, мутагенезу, секвенування ДНК.