1 Тодоров С.С. 1 Босенко С.Ж. 1 Босенко Е.С. 1 Луганська Р.Г. 1 Сафорьян Н.С. 1
1 ФГБУ «Ростовський науково-дослідний онкологічний інститут» Міністерства охорони здоров'я Росії
Проведено порівняльне морфоіммуногістохіміческое дослідження перстневідноклеточний карциноми (ПК) молочної залози. Біологічні ознаки ПК молочної залози до сих пір маловивчені. Для оцінки секреторною, гормональної, проліферативної активності ПК молочної залози необхідно визначити рецептори пухлини до статевих гормонів, в тому числі естрогену, прогестерону, індексу проліферації Ki-67 спільно з оцінкою продукції слизу різного складу. У зв'язку з цим нами враховувалися і аналізувалися наступні показники: рецептори до естрогену, прогестерону, Her-2 / neu, Ki-67, MUC2, MUC5A в тканини ПК молочної залози. Після виконання морфологічного і імуногістохімічного досліджень було показано, що ПК є рідкісною пухлиною молочної залози, містить рецептори до естрогену, прогестерону, невисокий індекс проліферації Ki-67, відрізняється імунофенотипові в первинної пухлини і метастази. Секреторна активність клітин ПК у вигляді накопичення муцинів MUC2, MUC5A не визначена. Описані морфобіологічні особливості ПК молочної залози дозволяють уточнити лікарську терапію і уточнити прогноз захворювання.
імуногістохімічне дослідження
молочна залоза
перстневідноклеточний карцинома
1. Імуногістохімічні методи: керівництво. Російське видання під редакцією Г. А. Франка та П. Г. Малькова // 2011 - С.91-97
2. Кіт О.І., Шатова Ю.С., Тодоров С.С. і співавт. Гетерогенність люмінальной раку молочної залози у жінок з різним репродуктивним статусом // Російський онкологічний журнал. - 2014. -Т.19, №6. - С.14-17.
3. Кіт О.І., Шатова Ю.С., Тодоров С.С. і співавт. Частота виникнення різних молекулярно-біологічних підтипів раку молочної залози в залежності від репродуктивного статусу // Російський онкологічний журнал. - 2014. - т.19, №5. - С.24-27.
4. Тодоров С.С., Кіт О.І., Босенко Е.С. і співавт. Морфоіммуногістохіміческая характеристика синхронного білатерально раку молочних залоз // Бюлетень експериментальної біології і медицини. - 2014. - т.15, №5. - С.663-666.
5. Тодоров С.С., Босенко С.Ж-П., Босенко Е.С. і співавт. Морфобіологічні особливості Метапластична карциноми молочної залози // Міжнародний журнал прикладних і фундаментальних досліджень. - 2014. - Ч.4, №11. -С.680-684.
6. Рак молочної залози. Морфологічна діагностика та генетика. Практичний посібник для лікарів. Під редакцією Г.А. Франка, Л.Е. Завалишиної К.М. Пожірісского. М. 2014 року - С.171.
Клініко-морфологічні варіанти раку молочної залози (РМЗ), які використовуються різні класифікації, в тому числі ВООЗ, не вичерпують усього морфобіологічні різноманіття даної категорії пухлин. Згідно з даними літератури, більшість пухлин молочної залози виникають з термінальних відділів проток і часточок, і в ряді випадків цей факт ускладнює визначення гістологічного варіанту РМЗ [1,6].
Встановлення інфільтруючих неспецифічної карциноми молочної залози не завжди є виправданим, тому що в ряді спостережень пухлина має гетерогенну структуру, представлену різними типами клітин. В цьому випадку оцінка біологічних властивостей самої пухлини дозволяє оцінити її гістогенез, секреторну і гормональну активність, а значить судити про інвазивних властивості і можливості застосування таргетних лікування [1,2].
Подання про гістогенез РМЗ, його молекулярно-біологічних ознаках, особливостях зростання сильно змінилося і стало більш повним завдяки використанню методу імуногістохімічної діагностики різних варіантів РМЗ. У зв'язку з цим з'явилися нові підтипи РМЗ, що враховують наявність рецепторів гормонів (естрогену, прогестерону, андрогену), HER-2 статус, індекс проліферативної активності пухлини, що дозволило застосувати сучасні методи лікування, в тому числі, використання таргетних препаратів [2,3,4 , 5]. Однак, як показує досвід вивчення морфологічних, імуногістохімічних властивостей РМЗ, цим не вичерпується опис тільки представлених біологічних молекул. Залишаються маловивченими окремі види РМЗ, в тому числі базальноклітинний, метапластичні, перстневідноклеточний карциноми, що представляють для дослідників не тільки практичний - лікувальний, а й теоретичний - фундаментальний інтерес. Перстневідноклеточний рак молочної залози представляє найбільш рідкісну нозологічну форму раку цієї локалізації. До сих пір маловивченими залишаються питання, пов'язані з визначенням первинної локалізації пухлини, здатності до продукції секреторних речовин, гормональної активності. Крім того, суперечливими залишаються аспекти оцінки HER-2 / neu в перстневідноклеточний раках молочної залози.
Рак з перстневідноклеточний дифференцировкой характеризується наявністю клітин з великою кількістю муцина в цитоплазмі, отдавлівать ядро на периферію. Істинний первинний РМЗ, що складається з перснеподібних клітин, зустрічається вкрай рідко. Найчастіше він поєднується з інвазивним часточковим раку у вигляді фокального скупчення клітин пухлини. Рідше персневидноклітини клітиниє при інвазивному раку неспецифічного типу та інших варіантах РМЗ. Однак в ряді випадків виникають труднощі, що стосуються оцінки даної категорії пухлин, їх диференціації з пухлинами шлунково-кишкового тракту і легенів [1,6].
У зв'язку з цим метою нашого дослідження було порівняльне морфоіммуногістохіміческое дослідження перстневідноклеточний РМЗ.
матеріали та методи
Вивчено 7 спостережень перстневідноклеточний РМЗ, оперованих у відділеннях мамології ФГБУ «Ростовський НДІ онкології» МОЗ Росії за період 2011-2015 рр. Середній вік жінок склав 52 роки. Після виконання секторальної резекції проводилося термінове гістологічне дослідження операційного матеріалу. Інша частина матеріалу окремо вирізувалася у вигляді пластин розмірами не більше 1 см в довжину, заливалася в забуферений 10% формалін, фіксувалася не більше 24 годин, після рутинної проводки заливалася в парафін. Після цього з парафінових блоків виготовлялися гістологічні зрізи товщиною 3-4 мкм на ротаційному мікротому Accu-Cut SRM 200 фірми Sakura (Японія) які забарвлювалися гематоксиліном-еозином.
Окремо для проведення імуногістохімічного дослідження отримані гістологічні зрізи наносили на високоадгезивні скла і висушували вертикально в термостаті при температурі 55-56 ° С протягом 10 годин.
Депарафінізації, відновлення антигенної активності і всі етапи імуногістохімічної реакції, а також докраску гематоксилином проводили в іммуногістостейнере VENTANA BenchMark ULTRA фірми Roche (Швейцарія).
В якості системи детекції первинних антитіл була використана «ultraView Universal DAB Detection», вироблена фірмою Roche для VENTANA.
Антитіла, використані для імунногістохіміческіх реакцій, їх характеристики і робоче розведення представлені в таблиці.
характеристика антитіла
№
п / п
Найменування
клон
Фірма виробник
Розведення
1.
Моноклональні кролячі до рецепторів Естрогену
SP 1
Spring Bio
1: 250
2.
Моноклональні кролячі до рецепторів Прогестерона
SP 2
Spring Bio
1: 350
3.
Моноклональні кролячі до Ki-67
SP 6
Spring Bio
1: 200
4.
Моноклональні кролячі до HER2 / neu
V9
Roche / Ventana
rtu
5.
Моноклональні мишачі до MUC2
E 30
Dako
1:50
6.
Моноклональні мишачі до MUC5A
D 5/16 B4
Dako
1: 100
Результати дослідження та їх обговорення
При макроскопічному дослідженні перстневідноклеточний РМЗ був представлений пухлинних вузлом щільної консистенції діаметром, що не перевищує 1,5 см, з белесоватой перламутровою поверхнею на розрізі. При гістологічному дослідженні виявлялися солідні пласти пухлинних клітин з типовою прозорою цитоплазмою і зміщеним до периферії клітин ядром (рис.1).
Рис.1. Перстневідноклеточний рак: солідне розташування типових перснеподібних клітин пухлини. Окр. гематоксиліном-еозином. Х400
Для оцінки гормонального статусу пухлини оцінювалася поширеність і ступінь експресії рецепторів до естрогену і прогестерону. Було показано, що у всіх спостереженнях була гіперекспресія до рецепторів естрогену більше 75% ядер клітин, до рецепторів прогестерону більше 85% ядер клітин (ріс.2,3).
Таким чином, було показано, що перстневідноклеточний РМЗ є гормонально-залежним.
Рис.2. Гіперекспресія рецепторів до естрогену (більше 75%) в первинної перстневідноклеточний карциноме молочної залози. ІГХ-реакція.х200
Рис.3. Гіперекспресія рецепторів до прогестерону (більше 85%) в первинної перстневідноклеточний карциноме молочної залози. ІГХ-реакція.х200
HER-2 / neu білок не експресуватися в тканини пухлини, що вказувало на відсутність специфічних рецепторів на поверхні клітин пухлини (рис.4).
Рис.4. HER-2 / neu негативна реакція клітин пухлини. ІГХ-реакція.х200
При оцінці рівня проліферативної активності Ki-67 відзначалася нерівномірна вогнищева експресія ядер пухлинних клітин не більше ніж в 15%. Це могло свідчити про наявність низької проліферативної активності здебільшого пухлини з перевагою в ній секреторного гормонального компонента.
Додаткові забарвлення з білками MUC2, MUC 5A не виявили наявності муцинов в цитоплазмі перснеподібних клітин пухлини, що підтверджувало факт тільки гормональної продукції перстневидного клітинами.
Для оцінки морфобіологічні властивостей перстневідноклеточний РМЗ проводилася порівняльна оцінка первинної пухлини і її метастазів в лімфатичні вузли. Було відзначено, що у всіх спостереженнях в метастазах експресія і поширеність рецепторів до естрогену, прогестерону нагадувала такі зміни в первинної пухлини.
HER-2 статус пухлини в метастатичних вогнищах був негативний, білки MUC2, MUC5A не виявлялись в пухлини. Однак індекс проліферативної активності Ki-67 був значно вище в порівнянні з первинною карциномою і становив 25-35% ядер клітин неоплазии, при цьому часто зустрічалися атипові клітини з великими ядрами (рис.5).
Рис.5. Ki-67 в метастазі перстневідноклеточний раку становить 25% ядер клітин. ІГХ-реакція.х200
висновок
Перстневідноклеточний рак молочної залози (ПРМЖ) є досить рідкісним захворюванням молочної залози, який зустрічається у жінок пострепродуктивном періоду. Відмінними рисами ПРМЖ слід вважати наявність перснеподібних клітин, що будують солідні структури, що містять клітини з прозорою цитоплазмою і зміщеним до периферії ядром. Імуногістохімічне дослідження дозволяє доповнити уявлення про дану категорію РМЗ як про пухлину, яка має гормональної залежністю (гормон-позитивні пухлини), що не експресують муцини (MUC2, MUC5A), HER-2 / neu негативні, з низьким потенціалом злоякісного росту (Ki-67 не перевищує 15%). У метастазах ПРМЖ відзначається більш високий рівень проліферативної активності (Ki-67 більш 25-35%) при збереженні експресії гормонів клітинами пухлини.
Ми вважаємо, що ПРМЖ по своїй біологічній підтипу відносяться в люмінальной підтипу В, HER-2 негативні, які мають досить сприятливим прогнозом. Однак поява вогнищ підвищеної проліферативної активності в метастазах ПРМЖ може вказувати на клітинну нестабільність, дисрегуляцию клітинно-міжклітинних систем, а значить поява активних клітинних клонів, здатних до поділу. Ці питання, безсумнівно, вимагають свого подальшого вивчення і адекватної клінічної і прогностичної оцінки.
рецензенти:
Ващенко Л.М., д.м.н., професор, завідувач відділенням пухлин м'яких тканин, кісток і молочної залози ФГБУ «РНІОІ» М3 РФ, г. Ростов-на-Дону;
Ніколаєва Н.В., д.м.н., лікар-онколог відділення онкогематології ФГБУ «РНІОІ» М3 РФ, г. Ростов-на-Дону.
бібліографічна посилання
Тодоров С.С., Босенко С.Ж., Босенко Е.С., Луганська Р.Г., Сафорьян Н.С. БІОЛОГІЧНІ ОСОБЛИВОСТІ перстневідноклеточний раку молочної залози У первинної пухлини і метастази // Сучасні проблеми науки та освіти. - 2015. - № 4 .;
URL: http://www.science-education.ru/ru/article/view?id=21386 (дата звернення: 29.07.2019).
Пропонуємо вашій увазі журнали, що видаються у видавництві «Академія природознавства»
(Високий імпакт-фактор РИНЦ, тематика журналів охоплює всі наукові напрямки)
Ru/ru/article/view?
