СИСТЕМА ГРУПИ КРОВІ RH (резус): АНАЛІТИЧНИЙ ОГЛЯД - Сучасні проблеми науки та освіти (науковий журнал)...
СИСТЕМА ГРУПИ КРОВІ RH (резус): АНАЛІТИЧНИЙ ОГЛЯД - Сучасні проблеми науки та освіти (науковий журнал)
бібліографічна ПОСИЛАННЯ
СИСТЕМА ГРУПИ КРОВІ RH (резус): АНАЛІТИЧНИЙ ОГЛЯД - Сучасні проблеми науки та освіти (науковий журнал)
бібліографічна посилання
СИСТЕМА ГРУПИ КРОВІ RH (резус): АНАЛІТИЧНИЙ ОГЛЯД - Сучасні проблеми науки та освіти (науковий журнал)
бібліографічна посилання

СИСТЕМА ГРУПИ КРОВІ RH (резус): АНАЛІТИЧНИЙ ОГЛЯД - Сучасні проблеми науки та освіти (науковий журнал)
1 Шауцукова Л.З. 1 Шогенов З.С. 2
1 ФГБОУ ВПО «Кабардино-Балкарський державний університет ім. Х.М. Бербекова »
2 ГБОУ ВПО «Московський державний медико-стоматологічний університет імені А.І. Євдокимова »Міністерства охорони здоров'я Російської Федерації
Проведено огляд класичних і сучасних досліджень, присвячених системі групи крові резус - самої полиморфной і иммуногенной з 30 ідентифікованих систем груп крові. На основі аналізу численних зарубіжних літературних даних дана докладна характеристика генів локусу RH (гена RHD і гена RHСЕ), їх алелей, продуктів цих генів - білкових молекул, що вбудовуються в мембрану еритроцитів, - білків RhD і RhCE, структури епітоповрезус-антігеновD, C, E , c і e. Виділена і систематизована номенклатура резус-антигенів, що застосовується в науковій літературі в наші дні. Описана можлива організація резус-комплексу в мембрані еритроцитів і роль резус-протеїну RhAG в процесі складання і перенесення з цитоплазми в мембрану еритроцитів білків RhD і RhCE. Виконано критичний аналіз різних поглядів на передбачувані функції антигенів системи резус в мембранах еритроцитів і клітин тканин. Дана детальна характеристика варіантів антигену D, що утворилися в результаті мутацій гена RHD - Dweak (слабкого антигену D), Dpartial - часткового антигену D і резус-антигену фенотипу DEL. Обговорено можливі механізми імунізації реципієнтів в процесі трансфузии резус-несумісних еритроцитів, викликаної продуктами мутантних генів. Подано порівняльну характеристику різних методик визначення резус-сумісності.
система групи крові RН (Резус)
резус-протеїни RhD і RhCE
антитіла анти-резус
антигени D
C
C
E
E
1. Іммуносерологія (нормативні документи) / уклад.: Башлай А.Г., Донсков С.І. др М .: МОЗ РФ, Гематологический центр РАМН, 1998. - 204 с.
2. Apoil PAAhumanmonoclonalanti-Dantibodywhichdetectsanonconformation-dependentepitopeontheRhDproteinbyimmunoblotting / P.А. Apoil, ME Reid, G. Halverson [et al.] // British Journal ofHaematology. - 1997. - Vol. 98, no. 2. - P. 365-374.
3. Avent ND Molecular biology of partial D phenotypes / ND Avent, KM Finning, W.Liu, ML Scott // Transfusion Clinique etBiologique. - 1996. - Vol. 3, Issue 6. -P. 511-516.
4. Avent ND Immunochemical analysis of the human erythrocyte Rh polypeptide / ND Avent, W. Liu, KM Warner // Journal of Biological Chemistry. - 1996. -271. - P. 14233-14239.
5. Avent ND The Rh blood group system: a review / ND Avent, M. Reid // Blood. -2000. - V. 95 (2). - P. 375-387.
6. Biver S. Physiological role of the putative ammonium transporter RhCG in the mouse / S. Biver, S. Scohy, J. Szpirer [et al.] // Transfusion Clinique etBiologique. - 2006. - 13 (1-2). -P. 167-168.
7. Cherif-Zahar B. Organization of the gene encoding the human blood group Rh CcEe antigens and characterization of the promoter region / B. Cherif-Zahar, M. Mattei, C. Le Van Kim [et al.] // Genomics. - 1994. - Vol. 19, Issue 1. - P. 68-74.
8. Chou STThe Rh system: Roback JD, ed. Technical Manual. Bethesda (MD) / ST Chou, CM Westhoff // American Association of Blood Banks. - 2011. -P. 389-410.
9. Conroy M. Modelling the human rhesus proteins: implications for structure and function / M. Conroy, P. Bullough, M. Merrick, N. Avent // British Journal of Haematology. -2005. - Vol. 131. - Р. 541-543.
10. Daniels G. International Society of Blood Transfusion Committee on terminology for red blood cell surface antigens: Macao report / G. Daniels, L. Castilho, W. Flegel [et al.] // VoxSanguinis. - 2009. - Vol. 96 (2). - P. 153-156.
11. Enosolease ME Distribution of ABO, and RHD blood groups in the Benin area of Niger- Delta implication for regional blood transfusion / ME Enosolease, GN Bazuage // Asian Journal of Science and Technology. - 2008. - 2 (1). - P. 3-5.
12. Eyers SA Topology and organization of human Rh (rhesus) blood group-related polypeptides / SA Eyers, K. Ridgwell, WJ Mawby, MJ Tanner // Journal of Biological Chemistry. - 1994. - 269. -P. 6417-6423.
13. Fathelrahman M. Hasan. The Frequency of Rhesus aleles, heplotypes and genotypes in major sakaka city population, aljouf region, Saudia Arabia / M. Hasan Fathelrahman, A. Meshref, Alruwail and Atef H. Abdelhamid // Asian Journal of Science and Technology. - 2013. - 4 (03). -P. 4-48.
14. Flegel WA How I manage donors and patients with a weak D phenotype // Current Opinion in Hematology. - 2006. - 13 (6). - P. 476-483.
15. Garratty G. Do we need to be more concerned about weak D antigens? // Transfusion. - 2005. - Vol. 45, Issue 10. - P. 1547-1551.
16. Haer-Wigman L. RHD and RHCE variant and zygosity genotyping via multiplex ligation-dependent probe amplification / L. Haer-Wigman, B. Veldhuisen, R. Jonkers [et al.] // Transfusion. - 2013. -53 (7). -P. 1559-1574.
17. Huang CH Molecular insights into the Rh protein family and associated antigens // Current Opinion in Hematology. - 1997. - Vol. 4, Issue 2. -P. 94-103.
18. Huang CH Rhnull disease: the amorph type results from a novel double mutation in RhCe gene on D-negative background / CH Huang, Y. Chen, ME Reid, C. Seidl // Blood. - 1998. -92 (2). - P. 64-71.
19. Kustu S. Biological gas channels for NH3 and CO2: evidence that Rh (rhesus) proteins are CO2 channels / S. Kustu, W. Inwood // Transfusion Clinique etBiologique. - 2006. - 13 (1-2). -P. 103-110.
20. Huang CH Rh50 glycoprotein gene and Rhnull disease: a silent splice donor is trans to a Gly279-> Glu missense mutation in the conserved transmembrane segment / CH Huang, Z. Liu, GJ Cheng, Y. Chen // Blood. - 1998. - 92 (5). -P. 1776-1784.
21. Landsteiner K. An aglutinable factor in human blood recognized by immune sera for rhesus blood / K. Landsteiner, AS Wiener // Proceedings of The Society Experimental Biology and Medicine. - 1940. - 43. - P. 223-224.
22. Le van Kim C. Molecular cloning and primary structure of the human blood group RhD polypeptide. / C. Le van Kim, I. Mouro, B. Cherif-Zahar [et al.] // Proceeding of The National Academy of Scinces USA. - 1992. - 89 (22). - P. 10925-10929.
23. Levine P. A human 'D-like' antibody / P. Levine, MJ Celano, J. Walace, R. Sanger // Nature. - 1963. - 198. - P. 596-597.
24. Mak D. Characterization of ammonia transport by the kidney Rh glycoproteins RhBG and RhCG / D. Mak, B. Dang, I. Weiner, J. Foskett, C. Westhoff // American Journal Physiology RenalPhysiology. -2006. - Vol. 290.
25. Makro PN Weak D prevalence among Indian Blod Donors / RN Makro, Vimarsh Raina, MohitChowdhry [et al.] // Asian Journal of Science and Technology. - 2010. - 4 (2). - P. 137-139.
26. Marini AM The human RhesusassociatedRhAG protein and a kidney homologue promote ammonium transport in yeast / AM Marini, G. Matassi, V. Raynal [et al.] // Nature Genetics. - 2000. - 26. - P. 341-344.
27. Matassi G. The members of the RHgene family (RH50 and RH30) followed different evolutionary pathways / G. Matassi, B. Cherif-Zahar, G. Pesole, V. Raynal, JP Cartron // Journal Molecular Evolution. - 1999. - 48. -P. 151-159.
28. Mollison PL Blood Transfusion in Clinical Medicine / PL Mollison, CP Engelfriet, M. Contreras. - 10-th edition. - Oxford, UK: Blackwell Science.- +1997.
29. Nicolas V. Rh-RhAG / ankyrin-R, a new interaction site between the membrane bilayer and the red cell skeleton, is impaired by Rh (null) -associated mutation / V. Nicolas, C. Le Van Kim, P. Gane [et al.] // Journal of Biological Chemistry. -2003. - Vol. 278. - P. 25526-25533.
30. Poole J. RhD variant caused by an in-frame triplet duplication in the RHD gene / J. Poole, T. Chabert, ML Ribeiro // Transfusion. -2011. -51. -P. 570-573.
31. Race RR The Rh genotype and Fisher's theory // Blood. - 1948. - 3 (suppl 2). - P. 27-42.
32. Race RRA Posible Deletion in a Human Rh chromosome: a serological and genetical study / RR Race, Ruth Sanger, JG Selwyn // British Jornal of Experimental Pathology. - 1951. - 32 (2). - P. 124-135.
33. Shao CP Molecular background of Rh D-positive, D-negative, Del and weak D phenotypes in Chinese / CP Shao, JH Maas, YQ Su [et al.] // Vox Sang. - 2002. - 83. - P. 156-161.
34. Silvy M.Weak D and DEL alleles detected by routine SNaPshot genotyping: identification of four novel RHD alleles / M. Silvy, S. Simon, J. Gouvitsos [et al.] // Transfusion. - 2011. - 51 (2). -P. 401-411.
35. Wagner FF Molecular basis of weak D phenotypes / FF Wagner, C. Gasner, TH Müler [et. al.] // Blood. - 1999. - 93. - P. 385-393.
36. Wagner FF DNB: a partial D with anti-D frequent in Central Europe / FF Wagner, NI Eicher, JR Jorgensen [et al.] // Blood. - 2002. - 100. - P. 2253-2256.
37. Wagner FF Weak D alleles express distinct phenotypes / FF Wagner, A. Frohmajer, B. Ladewig [et al.] // Blood. - 2000. - 95. - P. 2699-2708.
38. Weiner Alexander S.Genetics and Nomenclature of the Rh-Hr Blood Types / Alexander S. Weiner // Antonie van Leeuwenhoek (Springerlink). - 1949. - 15, Issue 1. - P. 17-28.
39. Westhoff C. Identification of the erythrocyte Rh blood group glycoprotein as a mammalian ammonium transporter / CM Westhoff, M. Ferreri-Jacobia, D. Mak, J. Foskett // Journal of Biological Chemistry. -2002. - Vol. 277. - P. 12499-12502.
40. Westhoff CMThe Structure and Function of the Rh Antigen Complex / CM Westhoff // Seminars in Hematology. - 2007. - Vol. 44 (1). - P. 42-50.
41. Yasuda H. Secondary anti-D immunization by DEL red blood cells / H. Yasuda, H. Ohto, S. Sakuma, Y. Ishikawa // Transfusion. - 2005. - 45 (10). - P. 1581-1584.
Аутоімунні властивості крові є одним з найважливіших для практичної медицини розділів нормальної фізіології. Своєчасна трансфузія компонентів крові щодня рятує життя багатьох людей. На жаль, не завжди вдається уникнути грізних ускладнень, викликаних переливанням крові. Тим важливішим в освіті лікарів представляється глибоке проникнення в суть аутоімунних процесів. Найбільше число проблем, пов'язаних з переливанням крові, обумовлене високим поліморфізмом самої иммуногенной з 30 систем груп крові -системи групи крові резус. Подання про імуногенетичної характеристиці резус-антигенів необхідно для розуміння механізмів несумісності переливається крові і дозволить знизити число трансфузійних ускладнень.
1. Номенклатура антигенів системи RH
Система групи крові RH (резус) була відкрита в 1940 р Карлом Ландштейнером і Олександром Вінером [21]. Система RH представлена кількома десятками антигенів, багато з яких виникли внаслідок генних мутацій. У наші дні в науковій літературі в основному застосовуються дві номенклатури антигенів системи резус: Фішера-Рeйса (Fisher-Race) і Вінера (Weiner). За Фішеру-Рeйсу [31] найбільш клінічно значущі антигени системи Rh позначаються літерами D, С, Е, сі е, по Вінеру- Rh0, rh, rh, hrі hr відповідно [37]. За зменшенням імуногенності резус-антигени розташовуються в наступній послідовності: D, c, E, C і e. Антиген D зустрічається у 85% європейців, С - у 70%, с- у 85%, Е у 30% ие- у 97%.
2. Гени. структура антигенів
Клінічно значущі резус-антигени кодуються двома тісно пов'язаними генами - RHD і RHСЕ. Ці гени розташовуються в локусі RH 1-ї хромосоми. Ген RHСЕ має аллели RHce, RHCe і RHcE [7]. Ген RHD парного алелі не має. Відсутність рецесивного алеля гена RHD, пов'язане найчастіше з делеціейетого гена [32], прийнято позначати великої літерою d. Аллели локусу RH завжди успадковуються разом в різних комбінаціях: DCE, DCe, DcE, Dce, dCE, dCe, dcE і dce [16]. Особи, у яких ген RHDпрісутствуетна обох гомологічних хромосомах або на одній з них, є D-положітельнимі.Люді, у яких ген RHD отсутствуетна обох гомологічних хромосомах, вважаються D-негативними. Серед європейців D-негативних людей 15-17%, в Південній Африці - 5%, в Японії, Китаї, Монголії та Кореї - 3% [13; 33]. Навпаки, у басків лише 34% D-позитивних осіб. Відзначимо, що у европецев основною причиною D-отріцательності є делеція гена RHD, в той час як у африканців і азіатів часто виявляється неактивний (мовчить) ген RHD [25] або гібридний ген RHD-РЄ-D [16], що не експресуючий антиген D [11]. 20% D-негативних японців мають резус-фенотип DEL, що характеризується дуже низьким рівнем експресії антигену D.
Прорив в розумінні молекулярних основ системи резус стався в 90-х роках минулого століття, коли були клоновані гени локусу RH - ген RHD і ген RHСЕ [22]. З'ясувалося, що ці гени кодують дві білкові молекули, що вбудовуються в мембрану еритроцитів, -белокRhD і белокRhCE [4]. Частиною амінокислотної структури одного з цих білків - білка RhD- є антиген D. Білок RhCE, на відміну від білка RhD, формує два резус-антигену -антиген С (або з) і антиген Е (або е), успадкованих в блоці в різних комбінаціях : РЄ, се, се або се. Наявність двох різних антигенних детермінант в одній молекулі білка підтверджується виробленням двох типів антитіл в ході імунної відповіді, ініційованого білком RhCE, - анти-С (або анти-с) і анти-Е (або анти-е) [5].
Білки RhD і RhCE на 92% ідентичні за структурою (амінокислотним складом і конформації) в зв'язку з високою гомологичную кодують їх генів RHD і RHСЕ, обумовленої, ймовірно, генної дуплікацією [30]. Обидва білка складаються з 416 амінокислот і відрізняються лише 35 амінокислотами. У мембрані одного еритроцита міститься від 10 до 30 тисяч молекул ключових резус-антигенів. Резус-протеїни RhD і RhCE- це молекули, 12 раз перетинають мембрану еритроцитів в напрямку від внутрішньої поверхні до зовнішньої і потім знову до внутрішньої з С- і N-кінцями, орієнтованими до цитоплазми [9] (рис. 1).
Мал. 1. Структурна організація протеїну RhD
(З ConroyM. Etal., BritishJournalofHaematology. 2005)
Деякі ділянки цих білкових молекул, що виступають шістьма петлями над зовнішньою поверхнею мембрани еритроцитів, мають властивості епітопів - детермінантних областей антигену [12]. Застосування моноклональних антитіл, здатних взаємодіяти з епітопами лише одного типу, дозволило виявити в молекулі протеїну RhDепітопи 36 різних типів. Є підстави вважати, що в мембрані ерітроцітовD-позитивних людей два ключових резус-протеїну RhD і RhCE утворюють резус-комплекс з двома молекулами резус-асоційованого глікопротеїну - RhAG. У D-негативних осіб резус-комплекс, можливо, містить дві RhCE субодиниці (зазвичай се) і дві RhAG субодиниці [39].
Глікопротеїн RhAG на 40% ідентичний білків RhD і RhCE, що вказує на його приналежність до сімейства резус-протеїнів, і він, також як білки RhD і RhCE, 12 разів перетинає мембрану еритроцитів. Сімейство резус-протеїнів складають ключові резус-білки еритроцитів - носії антигенів D, С (або з), Е (або е) - і резус-асоційований глікопротеїн RhAG [27]. З резус-сімейством асоційовані десятки додаткових (accessory) гликопротеинов [17]. Очевидно, що таке значне різноманітність антигенних білків системи резус, пов'язане з випаданням окремих нуклеотидів, точковими нуклеотидними замінами в ланцюзі ДНК, транслокацией, зміною експресії антигенів та ін., Робить цю систему самої полиморфной з усіх відомих на сьогоднішній день систем груп крові. Генетичні дослідження останніх років виявили випадки обмінів між генами RHD і RHСЕ. Мутантні гени кодували гібридні резус-протеїни, у яких були RhD-специфічні області в молекулі Rhсе-протеїну і навпаки [8]. Еритроцити, що містять гібридні резус-протеїни Rhсе, могли взаємодіяти з деякими моноклональними антитілами анти-D.
Показано, що для експресії білків RhD і RhCE в мембрану еритроцитів необхідний глікопротеїн RhAG [29]. За відсутності протеїну RhAG порушується процес складання і перенесення з цитоплазми в мембрану еритроцитів ключових білків резус-комплексу - білків RhD і RhCE. Це підтверджується одним з фенотипів системи RH - фенотипом резус-нуль (Rhnull). Rhnull може бути наслідком мутації одного з генів великого комплексу резус-генів - гена RHAG, яка блокує утворення резус-асоційованого глікопротеїну RhAG. Виявилося, що в мембрані еритроцитів осіб фенотипу Rhnull відсутні не тільки молекули протеінаRhAG, але і резус-протеіниRhD і RhСЕ [20]. При цьому особи Rhnull можуть передавати у спадок антигени сімейства Резус своїм дітям (за аналогією з бомбейська фенотипом). Є відомості про наявність у осіб фенотипу Rhnull природних антитіл до всіх ключових антигенів системи резус.
Важливо відзначити, що у носіїв фенотипу Rhnull були виявлені морфологічні і фізіологічні зміни еритроцитів [18]. У червоних клітинах крові підвищувався осмотичнийтиск, вони набували форму сфероцітов, зменшувалася тривалість їх життя, наступав гемоліз [38]. Ці спостереження, а також безліч спеціальних досліджень переконують у тому, що сімейство резус-білків є суттєвою складовою цитоскелету еритроцитів і бере участь в транспорті води і аммоніячерез його мембрану [6; 19; 24].
Ключові антигени системи RH починають синтезуватися приблизно з 6-го тижня внутрішньоутробного розвитку плода. Експресія білків з резус-антигенами в мембрану пронормобластов відзначається вже на 38-42-й день ембріогенезу. Неерітроідние гомологи резус-білків виявлені в печінці, нирках, головному мозку і шкірі. Ці білки здійснюють трансмембранний перенос амонію в клітинах, що становлять ці органи [26].
3. Деякі варіанти антигену D, що утворилися в результаті мутацій гена RHD
А. Dweak - слабкий антиген D
У осіб фенотипу Dweak (від англ. Weak - слабкий), а вони складають 1,5% серед резус-позитивних, внаслідок точкової мутації гена RHD знижена експресія антигену D на мембрані еритроцитів [40]. У зв'язку з цим антиген Dweak не може бути ідентифікований рутинним методом - прямий агглютинацией з використанням сироваток анти-D. Щоб уникнути помилкового віднесення осіб фенотипу Dweak до числа D-негативних, кров усіх D-негативних донорів повинна бути досліджена спеціальними методами на наявність антигену Dweak [35].
Донори з антигеном Dweak визначаються як резус-позитивні (D-позитивні), тому що їх еритроцити можуть стимулювати утворення антитіл анти-D у D-негативних реципієнтів. При переливанні еритроцитів фенотипу DweakD-позитивним реципієнтам антитіла анти-D не продукує. Синтез анти-D в протилежній ситуації - у реципієнтів Dweakпрі переливанні їм D-позитивних еритроцитів - раніше вважався малоймовірним. Однак в останні роки з'являються відомості про випадки імунізації Dweakреціпіентов D-позитивними еритроцитами [14]. У зв'язку з цим реципієнтів з антигеном Dweak в трансфузійних процедурах рекомендують вести як резус-негативних (D-негативних).
При визначенні резус-приналежності лабораторії видають особам фенотипу Dweak коментар: «Виявлено слабкий резус-антиген (Dweak), рекомендується при необхідності переливати резус-негативну кров». Втім, питання про імунних властивостях фенотипу Dweak продовжує активно обговорюватися в наукових колах [15].
Б. Dpartial- частковий антиген D
Частковий (парціальний, варіантний) антиген D-Dpartial- відрізняється від антигену Dотсутствіемодного або декількох з відомих 36-ти епітопів [3]. При цьому кількість RhD-протеїнів в мембрані еритроцитів залишається таким же, як у осіб з нормальним антигеном D. У реципієнтів Dpartialвозможно утворення антитіл проти відсутніх епітопів антигену D при переливанні їм D-позитивної крові або під час вагітності [36]. У зв'язку з цим реципієнти фенотипу Dpartialсчітаются D-негативними, а донори - D-позитивними. Деякі Dpartialявляются результатом точкових мутацій в гені RHD, інші виникають внаслідок гібридизації генів RHD і RHСЕ.
В. Фенотип DEL
Фенотип DEL широко поширений у азіатських етносів. У Китаї і Японії він становить до 17% від числа резус-негативних осіб, виявлених серологічно. У європейців встечаются дуже рідко. Характеризується виключно низькою експресією антигену D. Не дивлячись на цю обставину, еритроцити фенотипу DEL можуть викликати імунну реакцію у D-негативних реципієнтів [41]. До сих пір немає серологічних реагентів, які визначали б цей фенотип. Ідентифікація донорів DEL проводиться лише генетичним скринінгом [34]. Оскільки DEL належить до числа слабких D-фенотипів, на представників цього фенотипу поширюються ті ж рекомендації з приводу гемотрансфузії, що і на осіб Dweak: донори вважаються резус-позитивними (D-позитивними), а реципієнти - резус-негативними (D-негативними) .
4. Антирезус антитіла
Антитіла антирезус є імуннімі антітіламі [23]. На відміну від природних антитіл системи АВ0, антитіла до антигенів системи резус виробляються в процесі імунних реакцій (изосенсибилизации).
Антитіла до антигенів системи резус, які утворюються при первинному імунній відповіді, в основному належать до імуноглобулінів М, серологічно визначаються через кілька тижнів після зустрічі з антигеном (найчастіше), досягають максимальної концентрації через 1-2 місяці. Антитіла, синтезовані при вторинному імунній відповіді, в значній мірі належать до імуноглобулінів G, з'являються в крові через кілька днів після впровадження антигену і відразу у високій концентрації.
IgM і IgG, зв'язавшись з відповідними антигенами еритроцитів, активують комплемент класичним шляхом і фагоцитирующие клітини крові.
5. Визначення резус-сумісності при переливанні крові
Резус-антигени можуть бути виявлені поруч методів:
- реакцією аглютинації з моноклональними антитілами анти-D, анти-С, анти-с, анти-E, анти-е;
- реакцією аглютинації з універсальним реагентом антірезусD;
- іншими високоефективними і надійними методиками [1] .
Длядоноров в наші дні найчастіше застосовується наступний алгоритм визначення резус-приналежності. Універсальним реагентом антірезусD, що містить антитіла анти-D, в еритроцитах донора виявляється антиген D: аглютинація еритроцитів антитілами анти-D вказує на наявність антигену D на поверхні еритроцитів, відсутність аглютинації - на відсутність антигену D. Якщо антиген D невиявлений, еритроцити донора обстежуються моноклональними антитілами анти-С і анти-E на наявність антигенів C і E [1].
Донори, в еритроцитах яких виявлено хоча б один з ключових резус-антигенів, що позначаються великими літерами (D, і / або C, і / або E), Вважається резус-позитивними. Особи, у яких відсутні антигени D, C і E (фенотип dce), є резус-негативними донорами. У реципієнтів визначається антиген D універсальним реагентом антірезусD.
У тому випадку, якщо всі ключові резус-антигени виявляються моноклональними антитілами, важливо мати на увазі, що МАО синтезуються invitro одним штамом плазматичних клітин [2]. Ці антитіла комплементарні лише до одного типу епітопи антигену. Якщо, наприклад, в досліджуваних D-позитивних еритроцитах дана детермінанта відсутня (як у Dpartial), кров буде вважатися D-негативною з усіма наслідками, що випливають звідси наслідками. Щоб уникнути подібних помилок еритроцити, ідентифіковані МКА як D-негативні, повинні додатково тіпіроватьсяполіклональнимі анти-D антитілами, що містяться в універсальному реагенте антірезусD. Це пов'язано з тим, що один антиген може містити кілька різних або / і однакових епітопів, при цьому всеепітопи одного антигену здатні зв'язуватися з антитілами, синтезованими в організмі (invivo) всіма штамами плазмоцитов у відповідь на впровадження даного антигену-поліклональних антитіл.
Універсальний реагент антірезусD є сироваткою крові D-негативних осіб групи крові АВ (IV), сенсибілізованих до антигену D попередніми вагітностями і / або трансфузиями крові, а також штучно імунізованих донорів-добровольців. У цій сироватці містяться антитіла анти-D. Універсальної сироватку робить відсутність в ній природних антитіл анти-А і анти-В, які можуть агглютинацией по системі АВ0 замаскувати специфічну взаємодію антитіл анти-D з антигеном D.
В особливих випадках (поки ще) для визначення резус-сумісності пар «донор - реципієнт» на Станція переливання крові проводиться фенотипування крові по резус-антигенів. Фенотіпірованіе- це серологічне типування еритроцитів за всіма основними антигенів системи резус -D, C, c, E і e. При необхідності також визначаються деякі слабкі резус-антигени і парціальні антигени D. У трансфузіологічні співтоваристві Росії обговорюється питання про необхідність введення в нашій країні обов'язкового фенотипування донорів по 9 трансфузійної значущим антигенів - А, В, D, з, Е, С, е, Кеllі Cw, - шість з яких представляють саму імуногенну з 30-ти систем груп крові - систему резус [10]. Тільки індивідуальний підбір пар «донор-реципієнт», заснований на сумісності їх резус-фенотипів, може забезпечити безпеку переливання крові.
6. Природа резус-несумісності при гемотрансфузії
Резус-несумісність може бути викликана двома причинами - імунізацією реципієнта відсутнім в його еритроцитах резус-антигеном (антигенами) донора або введенням еритроцитів аллоіммунізірованному реципієнту [28]. Розглянемо на прикладах механізм імунізації реципієнтів в процесі трансфузии резус-несумісних еритроцитів.
1. Припустимо, через недостатню оснащеності серологічної лабораторії у донори не виявленсодержащійся в його ерітроцітахслабий антиген D-Dweak. Констатація відсутності антигену D дозволяє відповідальній особі станції переливання крові зробити висновок про D-отріцательності досліджуваної крові (в процесі фенотипування в еритроцитах донора ідентифіковані також антигени з і е) .Таким чином, фенотип донора ошібочноопределен як dce. Еритроцити фенотіпірованного донора використовуються для трансфузии резус-негативному (D-негативному) реципієнту з «аналогічним» фенотипом. D-позитивні еритроцити донора (Dweak), вступаючи в кровотік D-негативного реципієнта, розпізнаються В-лімфоцитами як чужорідні. Активовані В-лімфоцити трансформуються в плазматичні клітини, які починають синтезувати і секретувати в кров антитіла, комплементарні антигену Dweak еритроцитів донора - анти-Dweak. У крові реципієнта анти-Dweakсвязиваютсяс антигенами Dweakмембрани еритроцитів донора. Освіта комплексу «антиген-антитіло» на поверхні еритроцитів резус-несумісної донора активує комплемент класичним шляхом, в результаті чого мембраноатакующего комплекс руйнує мембрану еритроцитів донора.
2. Інший випадок. Припустимо, проводиться трансфузія D-позитивних еритроцитів донора D-позитивному реципієнту з не ідентифікованим фенотипом Dpartial. До складу антигену D донора входять всі детермінантні групи антигену-безліч різних епітопів, Dpartial реципієнта позбавлений деяких з них. Детермінанти D-антигену донора, відсутні в структурі Dpartial реципієнта, запускають імунну реакцію, спрямовану на руйнування і елімінацію еритроцитів донора.
Зауважимо, що далеко не кожна резус-несумісна, по ідеї, ситуація дозволяється освітою антирезус антитіл. Близько 30% D-негативних людей не піддаються алоімунізації навіть при переливанні їм великих обсягів D-позитивної крові. Це пов'язано з індивідуальними особливостями імунних реакцій, можливістю виникнення толерантності до певних антигенів.
Рецензенти:
Лебедєва А.Ю., д.м.н., професор кафедри госпітальної терапії №1 ГБОУ ВПО «Російський національний дослідницький університет ім. Н.І. Пирогова »МОЗ РФ, Москва;
Автандилов А.Г., д.м.н., професор, завідувач кафедри терапії та підліткової медицини Російської медичної академії післядипломної освіти (ГБОУ ДПО «РМАПО»), м.Москва.

бібліографічна ПОСИЛАННЯ

Шауцукова Л.З., Шогенов З.С. СИСТЕМА ГРУПИ КРОВІ RH (резус): АНАЛІТИЧНИЙ ОГЛЯД // Сучасні проблеми науки та освіти. - 2015. - № 2-1 .;
URL: http://www.science-education.ru/ru/article/view?id=17157 (дата звернення: 30.05.2019).

Пропонуємо вашій увазі журнали, что видають у видавництві «Академія природознавства»

(Високий імпакт-фактор РИНЦ, тематика журналів охоплює всі наукові напрямки)

СИСТЕМА ГРУПИ КРОВІ RH (резус): АНАЛІТИЧНИЙ ОГЛЯД - Сучасні проблеми науки та освіти (науковий журнал)

1 Шауцукова Л.З. 1 Шогенов З.С. 2

1 ФГБОУ ВПО «Кабардино-Балкарський державний університет ім. Х.М. Бербекова »

2 ГБОУ ВПО «Московський державний медико-стоматологічний університет імені А.І. Євдокимова »Міністерства охорони здоров'я Російської Федерації

Проведено огляд класичних і сучасних досліджень, присвячених системі групи крові резус - самої полиморфной і иммуногенной з 30 ідентифікованих систем груп крові. На основі аналізу численних зарубіжних літературних даних дана докладна характеристика генів локусу RH (гена RHD і гена RHСЕ), їх алелей, продуктів цих генів - білкових молекул, що вбудовуються в мембрану еритроцитів, - білків RhD і RhCE, структури епітоповрезус-антігеновD, C, E , c і e. Виділена і систематизована номенклатура резус-антигенів, що застосовується в науковій літературі в наші дні. Описана можлива організація резус-комплексу в мембрані еритроцитів і роль резус-протеїну RhAG в процесі складання і перенесення з цитоплазми в мембрану еритроцитів білків RhD і RhCE. Виконано критичний аналіз різних поглядів на передбачувані функції антигенів системи резус в мембранах еритроцитів і клітин тканин. Дана детальна характеристика варіантів антигену D, що утворилися в результаті мутацій гена RHD - Dweak (слабкого антигену D), Dpartial - часткового антигену D і резус-антигену фенотипу DEL. Обговорено можливі механізми імунізації реципієнтів в процесі трансфузии резус-несумісних еритроцитів, викликаної продуктами мутантних генів. Подано порівняльну характеристику різних методик визначення резус-сумісності.

система групи крові RН (Резус)

резус-протеїни RhD і RhCE

антитіла анти-резус

антигени D

1. Іммуносерологія (нормативні документи) / уклад.: Башлай А.Г., Донсков С.І. др М .: МОЗ РФ, Гематологический центр РАМН, 1998. - 204 с.

2. Apoil PAAhumanmonoclonalanti-Dantibodywhichdetectsanonconformation-dependentepitopeontheRhDproteinbyimmunoblotting / P.А. Apoil, ME Reid, G. Halverson [et al.] // British Journal ofHaematology. - 1997. - Vol. 98, no. 2. - P. 365-374.

3. Avent ND Molecular biology of partial D phenotypes / ND Avent, KM Finning, W.Liu, ML Scott // Transfusion Clinique etBiologique. - 1996. - Vol. 3, Issue 6. -P. 511-516.

4. Avent ND Immunochemical analysis of the human erythrocyte Rh polypeptide / ND Avent, W. Liu, KM Warner // Journal of Biological Chemistry. - 1996. -271. - P. 14233-14239.

5. Avent ND The Rh blood group system: a review / ND Avent, M. Reid // Blood. -2000. - V. 95 (2). - P. 375-387.

6. Biver S. Physiological role of the putative ammonium transporter RhCG in the mouse / S. Biver, S. Scohy, J. Szpirer [et al.] // Transfusion Clinique etBiologique. - 2006. - 13 (1-2). -P. 167-168.

7. Cherif-Zahar B. Organization of the gene encoding the human blood group Rh CcEe antigens and characterization of the promoter region / B. Cherif-Zahar, M. Mattei, C. Le Van Kim [et al.] // Genomics. - 1994. - Vol. 19, Issue 1. - P. 68-74.

8. Chou STThe Rh system: Roback JD, ed. Technical Manual. Bethesda (MD) / ST Chou, CM Westhoff // American Association of Blood Banks. - 2011. -P. 389-410.

9. Conroy M. Modelling the human rhesus proteins: implications for structure and function / M. Conroy, P. Bullough, M. Merrick, N. Avent // British Journal of Haematology. -2005. - Vol. 131. - Р. 541-543.

10. Daniels G. International Society of Blood Transfusion Committee on terminology for red blood cell surface antigens: Macao report / G. Daniels, L. Castilho, W. Flegel [et al.] // VoxSanguinis. - 2009. - Vol. 96 (2). - P. 153-156.

11. Enosolease ME Distribution of ABO, and RHD blood groups in the Benin area of Niger- Delta implication for regional blood transfusion / ME Enosolease, GN Bazuage // Asian Journal of Science and Technology. - 2008. - 2 (1). - P. 3-5.

12. Eyers SA Topology and organization of human Rh (rhesus) blood group-related polypeptides / SA Eyers, K. Ridgwell, WJ Mawby, MJ Tanner // Journal of Biological Chemistry. - 1994. - 269. -P. 6417-6423.

13. Fathelrahman M. Hasan. The Frequency of Rhesus aleles, heplotypes and genotypes in major sakaka city population, aljouf region, Saudia Arabia / M. Hasan Fathelrahman, A. Meshref, Alruwail and Atef H. Abdelhamid // Asian Journal of Science and Technology. - 2013. - 4 (03). -P. 4-48.

14. Flegel WA How I manage donors and patients with a weak D phenotype // Current Opinion in Hematology. - 2006. - 13 (6). - P. 476-483.

15. Garratty G. Do we need to be more concerned about weak D antigens? // Transfusion. - 2005. - Vol. 45, Issue 10. - P. 1547-1551.

16. Haer-Wigman L. RHD and RHCE variant and zygosity genotyping via multiplex ligation-dependent probe amplification / L. Haer-Wigman, B. Veldhuisen, R. Jonkers [et al.] // Transfusion. - 2013. -53 (7). -P. 1559-1574.

17. Huang CH Molecular insights into the Rh protein family and associated antigens // Current Opinion in Hematology. - 1997. - Vol. 4, Issue 2. -P. 94-103.

18. Huang CH Rhnull disease: the amorph type results from a novel double mutation in RhCe gene on D-negative background / CH Huang, Y. Chen, ME Reid, C. Seidl // Blood. - 1998. -92 (2). - P. 64-71.

19. Kustu S. Biological gas channels for NH3 and CO2: evidence that Rh (rhesus) proteins are CO2 channels / S. Kustu, W. Inwood // Transfusion Clinique etBiologique. - 2006. - 13 (1-2). -P. 103-110.

20. Huang CH Rh50 glycoprotein gene and Rhnull disease: a silent splice donor is trans to a Gly279-> Glu missense mutation in the conserved transmembrane segment / CH Huang, Z. Liu, GJ Cheng, Y. Chen // Blood. - 1998. - 92 (5). -P. 1776-1784.

21. Landsteiner K. An aglutinable factor in human blood recognized by immune sera for rhesus blood / K. Landsteiner, AS Wiener // Proceedings of The Society Experimental Biology and Medicine. - 1940. - 43. - P. 223-224.

22. Le van Kim C. Molecular cloning and primary structure of the human blood group RhD polypeptide. / C. Le van Kim, I. Mouro, B. Cherif-Zahar [et al.] // Proceeding of The National Academy of Scinces USA. - 1992. - 89 (22). - P. 10925-10929.

23. Levine P. A human 'D-like' antibody / P. Levine, MJ Celano, J. Walace, R. Sanger // Nature. - 1963. - 198. - P. 596-597.

24. Mak D. Characterization of ammonia transport by the kidney Rh glycoproteins RhBG and RhCG / D. Mak, B. Dang, I. Weiner, J. Foskett, C. Westhoff // American Journal Physiology RenalPhysiology. -2006. - Vol. 290.

25. Makro PN Weak D prevalence among Indian Blod Donors / RN Makro, Vimarsh Raina, MohitChowdhry [et al.] // Asian Journal of Science and Technology. - 2010. - 4 (2). - P. 137-139.

26. Marini AM The human RhesusassociatedRhAG protein and a kidney homologue promote ammonium transport in yeast / AM Marini, G. Matassi, V. Raynal [et al.] // Nature Genetics. - 2000. - 26. - P. 341-344.

27. Matassi G. The members of the RHgene family (RH50 and RH30) followed different evolutionary pathways / G. Matassi, B. Cherif-Zahar, G. Pesole, V. Raynal, JP Cartron // Journal Molecular Evolution. - 1999. - 48. -P. 151-159.

28. Mollison PL Blood Transfusion in Clinical Medicine / PL Mollison, CP Engelfriet, M. Contreras. - 10-th edition. - Oxford, UK: Blackwell Science.- тисяча дев'ятсот дев'яносто сім.

29. Nicolas V. Rh-RhAG / ankyrin-R, a new interaction site between the membrane bilayer and the red cell skeleton, is impaired by Rh (null) -associated mutation / V. Nicolas, C. Le Van Kim, P. Gane [et al.] // Journal of Biological Chemistry. -2003. - Vol. 278. - P. 25526-25533.

30. Poole J. RhD variant caused by an in-frame triplet duplication in the RHD gene / J. Poole, T. Chabert, ML Ribeiro // Transfusion. -2011. -51. -P. 570-573.

31. Race RR The Rh genotype and Fisher's theory // Blood. - 1948. - 3 (suppl 2). - P. 27-42.

32. Race RRA Posible Deletion in a Human Rh chromosome: a serological and genetical study / RR Race, Ruth Sanger, JG Selwyn // British Jornal of Experimental Pathology. - 1951. - 32 (2). - P. 124-135.

33. Shao CP Molecular background of Rh D-positive, D-negative, Del and weak D phenotypes in Chinese / CP Shao, JH Maas, YQ Su [et al.] // Vox Sang. - 2002. - 83. - P. 156-161.

34. Silvy M.Weak D and DEL alleles detected by routine SNaPshot genotyping: identification of four novel RHD alleles / M. Silvy, S. Simon, J. Gouvitsos [et al.] // Transfusion. - 2011. - 51 (2). -P. 401-411.

35. Wagner FF Molecular basis of weak D phenotypes / FF Wagner, C. Gasner, TH Müler [et. al.] // Blood. - 1999. - 93. - P. 385-393.

36. Wagner FF DNB: a partial D with anti-D frequent in Central Europe / FF Wagner, NI Eicher, JR Jorgensen [et al.] // Blood. - 2002. - 100. - P. 2253-2256.

37. Wagner FF Weak D alleles express distinct phenotypes / FF Wagner, A. Frohmajer, B. Ladewig [et al.] // Blood. - 2000. - 95. - P. 2699-2708.

38. Weiner Alexander S.Genetics and Nomenclature of the Rh-Hr Blood Types / Alexander S. Weiner // Antonie van Leeuwenhoek (Springerlink). - 1949. - 15, Issue 1. - P. 17-28.

39. Westhoff C. Identification of the erythrocyte Rh blood group glycoprotein as a mammalian ammonium transporter / CM Westhoff, M. Ferreri-Jacobia, D. Mak, J. Foskett // Journal of Biological Chemistry. -2002. - Vol. 277. - P. 12499-12502.

40. Westhoff CMThe Structure and Function of the Rh Antigen Complex / CM Westhoff // Seminars in Hematology. - 2007. - Vol. 44 (1). - P. 42-50.

41. Yasuda H. Secondary anti-D immunization by DEL red blood cells / H. Yasuda, H. Ohto, S. Sakuma, Y. Ishikawa // Transfusion. - 2005. - 45 (10). - P. 1581-1584.

Аутоімунні властивості крові є одним з найважливіших для практичної медицини розділів нормальної фізіології. Своєчасна трансфузія компонентів крові щодня рятує життя багатьох людей. На жаль, не завжди вдається уникнути грізних ускладнень, викликаних переливанням крові. Тим важливішим в освіті лікарів представляється глибоке проникнення в суть аутоімунних процесів. Найбільше число проблем, пов'язаних з переливанням крові, обумовлене високим поліморфізмом самої иммуногенной з 30 систем груп крові -системи групи крові резус. Подання про імуногенетичної характеристиці резус-антигенів необхідно для розуміння механізмів несумісності переливається крові і дозволить знизити число трансфузійних ускладнень.

1. Номенклатура антигенів системи RH

Система групи крові RH (резус) була відкрита в 1940 р Карлом Ландштейнером і Олександром Вінером [21]. Система RH представлена кількома десятками антигенів, багато з яких виникли внаслідок генних мутацій. У наші дні в науковій літературі в основному застосовуються дві номенклатури антигенів системи резус: Фішера-Рeйса (Fisher-Race) і Вінера (Weiner). За Фішеру-Рeйсу [31] найбільш клінічно значущі антигени системи Rh позначаються літерами D, С, Е, сі е, по Вінеру- Rh0, rh, rh, hrі hr відповідно [37]. За зменшенням імуногенності резус-антигени розташовуються в наступній послідовності: D, c, E, C і e. Антиген D зустрічається у 85% європейців, С - у 70%, с- у 85%, Е у 30% ие- у 97%.

2. Гени. структура антигенів

Клінічно значущі резус-антигени кодуються двома тісно пов'язаними генами - RHD і RHСЕ. Ці гени розташовуються в локусі RH 1-ї хромосоми. Ген RHСЕ має аллели RHce, RHCe і RHcE [7]. Ген RHD парного алелі не має. Відсутність рецесивного алеля гена RHD, пов'язане найчастіше з делеціейетого гена [32], прийнято позначати великої літерою d. Аллели локусу RH завжди успадковуються разом в різних комбінаціях: DCE, DCe, DcE, Dce, dCE, dCe, dcE і dce [16]. Особи, у яких ген RHDпрісутствуетна обох гомологічних хромосомах або на одній з них, є D-положітельнимі.Люді, у яких ген RHD отсутствуетна обох гомологічних хромосомах, вважаються D-негативними. Серед європейців D-негативних людей 15-17%, в Південній Африці - 5%, в Японії, Китаї, Монголії та Кореї - 3% [13; 33]. Навпаки, у басків лише 34% D-позитивних осіб. Відзначимо, що у европецев основною причиною D-отріцательності є делеція гена RHD, в той час як у африканців і азіатів часто виявляється неактивний (мовчить) ген RHD [25] або гібридний ген RHD-РЄ-D [16], що не експресуючий антиген D [11]. 20% D-негативних японців мають резус-фенотип DEL, що характеризується дуже низьким рівнем експресії антигену D.

Прорив в розумінні молекулярних основ системи резус стався в 90-х роках минулого століття, коли були клоновані гени локусу RH - ген RHD і ген RHСЕ [22]. З'ясувалося, що ці гени кодують дві білкові молекули, що вбудовуються в мембрану еритроцитів, -белокRhD і белокRhCE [4]. Частиною амінокислотної структури одного з цих білків - білка RhD- є антиген D. Білок RhCE, на відміну від білка RhD, формує два резус-антигену -антиген С (або з) і антиген Е (або е), успадкованих в блоці в різних комбінаціях : РЄ, се, се або се. Наявність двох різних антигенних детермінант в одній молекулі білка підтверджується виробленням двох типів антитіл в ході імунної відповіді, ініційованого білком RhCE, - анти-С (або анти-с) і анти-Е (або анти-е) [5].

Білки RhD і RhCE на 92% ідентичні за структурою (амінокислотним складом і конформації) в зв'язку з високою гомологичную кодують їх генів RHD і RHСЕ, обумовленої, ймовірно, генної дуплікацією [30]. Обидва білка складаються з 416 амінокислот і відрізняються лише 35 амінокислотами. У мембрані одного еритроцита міститься від 10 до 30 тисяч молекул ключових резус-антигенів. Резус-протеїни RhD і RhCE- це молекули, 12 раз перетинають мембрану еритроцитів в напрямку від внутрішньої поверхні до зовнішньої і потім знову до внутрішньої з С- і N-кінцями, орієнтованими до цитоплазми [9] (рис. 1).

Рис. 1. Структурна організація протеїну RhD

(З ConroyM. Etal., BritishJournalofHaematology. 2005)

Деякі ділянки цих білкових молекул, що виступають шістьма петлями над зовнішньою поверхнею мембрани еритроцитів, мають властивості епітопів - детермінантних областей антигену [12]. Застосування моноклональних антитіл, здатних взаємодіяти з епітопами лише одного типу, дозволило виявити в молекулі протеїну RhDепітопи 36 різних типів. Є підстави вважати, що в мембрані ерітроцітовD-позитивних людей два ключових резус-протеїну RhD і RhCE утворюють резус-комплекс з двома молекулами резус-асоційованого глікопротеїну - RhAG. У D-негативних осіб резус-комплекс, можливо, містить дві RhCE субодиниці (зазвичай се) і дві RhAG субодиниці [39].

Глікопротеїн RhAG на 40% ідентичний білків RhD і RhCE, що вказує на його приналежність до сімейства резус-протеїнів, і він, також як білки RhD і RhCE, 12 разів перетинає мембрану еритроцитів. Сімейство резус-протеїнів складають ключові резус-білки еритроцитів - носії антигенів D, С (або з), Е (або е) - і резус-асоційований глікопротеїн RhAG [27]. З резус-сімейством асоційовані десятки додаткових (accessory) гликопротеинов [17]. Очевидно, що таке значне різноманітність антигенних білків системи резус, пов'язане з випаданням окремих нуклеотидів, точковими нуклеотидними замінами в ланцюзі ДНК, транслокацией, зміною експресії антигенів та ін., Робить цю систему самої полиморфной з усіх відомих на сьогоднішній день систем груп крові. Генетичні дослідження останніх років виявили випадки обмінів між генами RHD і RHСЕ. Мутантні гени кодували гібридні резус-протеїни, у яких були RhD-специфічні області в молекулі Rhсе-протеїну і навпаки [8]. Еритроцити, що містять гібридні резус-протеїни Rhсе, могли взаємодіяти з деякими моноклональними антитілами анти-D.

Показано, що для експресії білків RhD і RhCE в мембрану еритроцитів необхідний глікопротеїн RhAG [29]. За відсутності протеїну RhAG порушується процес складання і перенесення з цитоплазми в мембрану еритроцитів ключових білків резус-комплексу - білків RhD і RhCE. Це підтверджується одним з фенотипів системи RH - фенотипом резус-нуль (Rhnull). Rhnull може бути наслідком мутації одного з генів великого комплексу резус-генів - гена RHAG, яка блокує утворення резус-асоційованого глікопротеїну RhAG. Виявилося, що в мембрані еритроцитів осіб фенотипу Rhnull відсутні не тільки молекули протеінаRhAG, але і резус-протеіниRhD і RhСЕ [20]. При цьому особи Rhnull можуть передавати у спадок антигени сімейства Резус своїм дітям (за аналогією з бомбейська фенотипом). Є відомості про наявність у осіб фенотипу Rhnull природних антитіл до всіх ключових антигенів системи резус.

Важливо відзначити, що у носіїв фенотипу Rhnull були виявлені морфологічні і фізіологічні зміни еритроцитів [18]. У червоних клітинах крові підвищувався осмотичнийтиск, вони набували форму сфероцітов, зменшувалася тривалість їх життя, наступав гемоліз [38]. Ці спостереження, а також безліч спеціальних досліджень переконують у тому, що сімейство резус-білків є суттєвою складовою цитоскелету еритроцитів і бере участь в транспорті води і аммоніячерез його мембрану [6; 19; 24].

Ключові антигени системи RH починають синтезуватися приблизно з 6-го тижня внутрішньоутробного розвитку плода. Експресія білків з резус-антигенами в мембрану пронормобластов відзначається вже на 38-42-й день ембріогенезу. Неерітроідние гомологи резус-білків виявлені в печінці, нирках, головному мозку і шкірі. Ці білки здійснюють трансмембранний перенос амонію в клітинах, що становлять ці органи [26].

3. Деякі варіанти антигену D, що утворилися в результаті мутацій гена RHD

А. Dweak - слабкий антиген D

У осіб фенотипу Dweak (від англ. Weak - слабкий), а вони складають 1,5% серед резус-позитивних, внаслідок точкової мутації гена RHD знижена експресія антигену D на мембрані еритроцитів [40]. У зв'язку з цим антиген Dweak не може бути ідентифікований рутинним методом - прямий агглютинацией з використанням сироваток анти-D. Щоб уникнути помилкового віднесення осіб фенотипу Dweak до числа D-негативних, кров усіх D-негативних донорів повинна бути досліджена спеціальними методами на наявність антигену Dweak [35].

Донори з антигеном Dweak визначаються як резус-позитивні (D-позитивні), тому що їх еритроцити можуть стимулювати утворення антитіл анти-D у D-негативних реципієнтів. При переливанні еритроцитів фенотипу DweakD-позитивним реципієнтам антитіла анти-D не продукує. Синтез анти-D в протилежній ситуації - у реципієнтів Dweakпрі переливанні їм D-позитивних еритроцитів - раніше вважався малоймовірним. Однак в останні роки з'являються відомості про випадки імунізації Dweakреціпіентов D-позитивними еритроцитами [14]. У зв'язку з цим реципієнтів з антигеном Dweak в трансфузійних процедурах рекомендують вести як резус-негативних (D-негативних).

При визначенні резус-приналежності лабораторії видають особам фенотипу Dweak коментар: «Виявлено слабкий резус-антиген (Dweak), рекомендується при необхідності переливати резус-негативну кров». Втім, питання про імунних властивостях фенотипу Dweak продовжує активно обговорюватися в наукових колах [15].

Б. Dpartial- частковий антиген D

Частковий (парціальний, варіантний) антиген D-Dpartial- відрізняється від антигену Dотсутствіемодного або декількох з відомих 36-ти епітопів [3]. При цьому кількість RhD-протеїнів в мембрані еритроцитів залишається таким же, як у осіб з нормальним антигеном D. У реципієнтів Dpartialвозможно утворення антитіл проти відсутніх епітопів антигену D при переливанні їм D-позитивної крові або під час вагітності [36]. У зв'язку з цим реципієнти фенотипу Dpartialсчітаются D-негативними, а донори - D-позитивними. Деякі Dpartialявляются результатом точкових мутацій в гені RHD, інші виникають внаслідок гібридизації генів RHD і RHСЕ.

В. Фенотип DEL

Фенотип DEL широко поширений у азіатських етносів. У Китаї і Японії він становить до 17% від числа резус-негативних осіб, виявлених серологічно. У європейців встечаются дуже рідко. Характеризується виключно низькою експресією антигену D. Не дивлячись на цю обставину, еритроцити фенотипу DEL можуть викликати імунну реакцію у D-негативних реципієнтів [41]. До сих пір немає серологічних реагентів, які визначали б цей фенотип. Ідентифікація донорів DEL проводиться лише генетичним скринінгом [34]. Оскільки DEL належить до числа слабких D-фенотипів, на представників цього фенотипу поширюються ті ж рекомендації з приводу гемотрансфузії, що і на осіб Dweak: донори вважаються резус-позитивними (D-позитивними), а реципієнти - резус-негативними (D-негативними) .

4. Антирезус антитіла

Антитіла антирезус є імуннімі антітіламі [23]. На відміну від природних антитіл системи АВ0, антитіла до антигенів системи резус виробляються в процесі імунних реакцій (изосенсибилизации).

Антитіла до антигенів системи резус, які утворюються при первинному імунній відповіді, в основному належать до імуноглобулінів М, серологічно визначаються через кілька тижнів після зустрічі з антигеном (найчастіше), досягають максимальної концентрації через 1-2 місяці. Антитіла, синтезовані при вторинному імунній відповіді, в значній мірі належать до імуноглобулінів G, з'являються в крові через кілька днів після впровадження антигену і відразу у високій концентрації.

IgM і IgG, зв'язавшись з відповідними антигенами еритроцитів, активують комплемент класичним шляхом і фагоцитирующие клітини крові.

5. Визначення резус-сумісності при переливанні крові

Резус-антигени можуть бути виявлені поруч методів:

- реакцією аглютинації з моноклональними антитілами анти-D, анти-С, анти-с, анти-E, анти-е;

- реакцією аглютинації з універсальним реагентом антірезусD;

- іншими високоефективними і надійними методиками [1] .

Длядоноров в наші дні найчастіше застосовується наступний алгоритм визначення резус-приналежності. Універсальним реагентом антірезусD, що містить антитіла анти-D, в еритроцитах донора виявляється антиген D: аглютинація еритроцитів антитілами анти-D вказує на наявність антигену D на поверхні еритроцитів, відсутність аглютинації - на відсутність антигену D. Якщо антиген D невиявлений, еритроцити донора обстежуються моноклональними антитілами анти-С і анти-E на наявність антигенів C і E [1].

Донори, в еритроцитах яких виявлено хоча б один з ключових резус-антигенів, що позначаються великими літерами (D, і / або C, і / або E), Вважається резус-позитивними. Особи, у яких відсутні антигени D, C і E (фенотип dce), є резус-негативними донорами. У реципієнтів визначається антиген D універсальним реагентом антірезусD.

У тому випадку, якщо всі ключові резус-антигени виявляються моноклональними антитілами, важливо мати на увазі, що МАО синтезуються invitro одним штамом плазматичних клітин [2]. Ці антитіла комплементарні лише до одного типу епітопи антигену. Якщо, наприклад, в досліджуваних D-позитивних еритроцитах дана детермінанта відсутня (як у Dpartial), кров буде вважатися D-негативною з усіма наслідками, що випливають звідси наслідками. Щоб уникнути подібних помилок еритроцити, ідентифіковані МКА як D-негативні, повинні додатково тіпіроватьсяполіклональнимі анти-D антитілами, що містяться в універсальному реагенте антірезусD. Це пов'язано з тим, що один антиген може містити кілька різних або / і однакових епітопів, при цьому всеепітопи одного антигену здатні зв'язуватися з антитілами, синтезованими в організмі (invivo) всіма штамами плазмоцитов у відповідь на впровадження даного антигену-поліклональних антитіл.

Універсальний реагент антірезусD є сироваткою крові D-негативних осіб групи крові АВ (IV), сенсибілізованих до антигену D попередніми вагітностями і / або трансфузиями крові, а також штучно імунізованих донорів-добровольців. У цій сироватці містяться антитіла анти-D. Універсальної сироватку робить відсутність в ній природних антитіл анти-А і анти-В, які можуть агглютинацией по системі АВ0 замаскувати специфічну взаємодію антитіл анти-D з антигеном D.

В особливих випадках (поки ще) для визначення резус-сумісності пар «донор - реципієнт» на Станція переливання крові проводиться фенотипування крові по резус-антигенів. Фенотіпірованіе- це серологічне типування еритроцитів за всіма основними антигенів системи резус -D, C, c, E і e. При необхідності також визначаються деякі слабкі резус-антигени і парціальні антигени D. У трансфузіологічні співтоваристві Росії обговорюється питання про необхідність введення в нашій країні обов'язкового фенотипування донорів по 9 трансфузійної значущим антигенів - А, В, D, з, Е, С, е, Кеllі Cw, - шість з яких представляють саму імуногенну з 30-ти систем груп крові - систему резус [10]. Тільки індивідуальний підбір пар «донор-реципієнт», заснований на сумісності їх резус-фенотипів, може забезпечити безпеку переливання крові.

6. Природа резус-несумісності при гемотрансфузії

Резус-несумісність може бути викликана двома причинами - імунізацією реципієнта відсутнім в його еритроцитах резус-антигеном (антигенами) донора або введенням еритроцитів аллоіммунізірованному реципієнту [28]. Розглянемо на прикладах механізм імунізації реципієнтів в процесі трансфузии резус-несумісних еритроцитів.

1. Припустимо, через недостатню оснащеності серологічної лабораторії у донори не виявленсодержащійся в його ерітроцітахслабий антиген D-Dweak. Констатація відсутності антигену D дозволяє відповідальній особі станції переливання крові зробити висновок про D-отріцательності досліджуваної крові (в процесі фенотипування в еритроцитах донора ідентифіковані також антигени з і е) .Таким чином, фенотип донора ошібочноопределен як dce. Еритроцити фенотіпірованного донора використовуються для трансфузии резус-негативному (D-негативному) реципієнту з «аналогічним» фенотипом. D-позитивні еритроцити донора (Dweak), вступаючи в кровотік D-негативного реципієнта, розпізнаються В-лімфоцитами як чужорідні. Активовані В-лімфоцити трансформуються в плазматичні клітини, які починають синтезувати і секретувати в кров антитіла, комплементарні антигену Dweak еритроцитів донора - анти-Dweak. У крові реципієнта анти-Dweakсвязиваютсяс антигенами Dweakмембрани еритроцитів донора. Освіта комплексу «антиген-антитіло» на поверхні еритроцитів резус-несумісної донора активує комплемент класичним шляхом, в результаті чого мембраноатакующего комплекс руйнує мембрану еритроцитів донора.

2. Інший випадок. Припустимо, проводиться трансфузія D-позитивних еритроцитів донора D-позитивному реципієнту з не ідентифікованим фенотипом Dpartial. До складу антигену D донора входять всі детермінантні групи антигену-безліч різних епітопів, Dpartial реципієнта позбавлений деяких з них. Детермінанти D-антигену донора, відсутні в структурі Dpartial реципієнта, запускають імунну реакцію, спрямовану на руйнування і елімінацію еритроцитів донора.

Зауважимо, що далеко не кожна резус-несумісна, по ідеї, ситуація дозволяється освітою антирезус антитіл. Близько 30% D-негативних людей не піддаються алоімунізації навіть при переливанні їм великих обсягів D-позитивної крові. Це пов'язано з індивідуальними особливостями імунних реакцій, можливістю виникнення толерантності до певних антигенів.

Рецензенти:

Лебедєва А.Ю., д.м.н., професор кафедри госпітальної терапії №1 ГБОУ ВПО «Російський національний дослідницький університет ім. Н.І. Пирогова »МОЗ РФ, Москва;

Автандилов А.Г., д.м.н., професор, завідувач кафедри терапії та підліткової медицини Російської медичної академії післядипломної освіти (ГБОУ ДПО «РМАПО»), м.Москва.