1 Шуматова Т.А. 1 Зернова Е.С. 1 Григорян Л.А. 1 Шишацька С.Н. 1
1 ГБОУ ВПО «Тихоокеанський державний медичний університет МОЗ Росії»
Вивчено інформативність визначення змісту кальпротектіна, зонуліна, еозинофільного катіонного протеїну, транстиретин, β-дефензіни 2 в копрофильтратах у дітей грудного віку з порушенням кишкового всмоктування. Обстежено 30 дітей з ентеропатію, індукованої білком коров'ячого молока, 30 дітей з лактазной недостатністю (ЛН) вторинного генезу і 20 здорових дітей раннього віку. Виявлено достовірне підвищення рівня кальпротектіна, зонуліна у дітей з непереносимістю білків коров'ячого молока (НБКМ) і ЛН. Збільшення вмісту (р
β-дефензіни 2
транстиретин
еозінофільноий катіонний протеїн
кальпротектін
зонулін
непереносимість білків коров'ячого молока
діти раннього віку
порушення кишкового всмоктування
1. Казюкова Т.В. Алергія до білків коров'ячого молока: стратегія вибору лікувального харчування (огляд літератури) / Т. В. Казюкова // Ефективна фармакотерапія. Педіатрія. - 2013. - № 3. - С. 31-34.
2. Клініко-лабораторний аналіз ентеральної нутритивной підтримки дітей з важкими формами порушення кишкового всмоктування / Т.А. Шуматова, Н.Г. Приходченко, І.В. Єфремова та ін. // Тихоокеанський медичний журнал. - 2013. - № 1. - С. 38-41.
3. Мамчур М.І., Лівих А.Е. Дефензіни - ендогенні пептиди з антиінфекційні і протипухлинні властивості / М.І. Мамчур, А.Е. Лівих // Таврійський медико-біологічний вісник. - 2012. - Т. 15.- № 2. - С. 315-321.
4. Шуматова Т.А., Приходченко Н.Г., Оденбах Л.А. Фекальний кальпротектін як маркер структурно-функціонального стану кишечника у дітей з харчовою непереносимістю / Т. А. Шуматова, Н.Г. Приходченко, Л.А. Оденбах // Далекосхідний медичний журнал. - 2012. - № 4. - С. 70-72.
5. Еозинофільні запальні захворювання шлунково-кишкового тракту і харчова алергія у дітей / П.В. Шумилов, М.І. Дубровська, О.В. Юдіна та ін. // Практична медицина. 2010. - № 3. - С. 16-25.
6. Ando Y. Transthyretin: it's miracle function and pathogenesis / Y. Ando // The Japanese Journal Of Clinical Pathology. - 2009 Mar. - Vol. 57. № 3. - P. 228-235.
7. Fasano A. Zonulin and ist regulation of intestinal barrier function: the biological door to inflammation, autoimmunity, and cancer / А. Fasano // Physiol. Rev. - 2011. - № 91. - Р. 151-175.
актуальність
Важливою проблемою сучасної педіатрії є зростання числа гастроентерологічних захворювань у дітей [2, 5]. Доведено, що кишечник не тільки виконує травну функцію, а й є важливим імунним органом [1, 5]. В ентероцитах відбувається всмоктування основних поживних речовин, необхідних для росту і розвитку організму. Клітини слизової оболонки кишечника беруть участь в процесах формування харчової толерантності, запобігаючи розвитку патологічних імунних реакцій до білків їжі. Порушення процесів порожнинного і пристінкового травлення в кишечнику призводять до дестабілізації обмінних процесів, формування нутритивной недостатності, полідефіцитних станів, харчової непереносимості (ПН) [2]. Незважаючи на значні успіхи, досягнуті у вивченні механізмів інтолерантності до харчових продуктів у дітей і дорослих, питання патогенезу, диференціальної діагностики та терапії ПН вивчені недостатньо. До теперішнього часу для з'ясування причини порушення кишкового всмоктування і формування явищ харчової алергії нерідко використовується значна кількість інвазивних тестів, що створює певні труднощі, особливо в молодших вікових групах. У зв'язку з цим в педіатричній практиці залишаються актуальними розробка системи неінвазивного моніторингу даних станів і впровадження нових діагностичних маркерів захворювань, що поліпшують ранню діагностику.
Мета дослідження
Вивчити вміст ендогенних пептидів і білків в копрофильтратах у дітей з синдромом мальабсорбції.
матеріали та методи
Під нашим спостереженням знаходилися 60 дітей у віці від 6 до 12 місяців з порушенням кишкового всмоктування і клінікою персистуючої діареї. Для вирішення поставленої мети пацієнти були розділені на 2 групи. 1-а група - 30 дітей, яким після комплексного обстеження був виставлений діагноз алергічної ентеропатії з непереносимістю білка коров'ячого молока. Пацієнти цієї групи мали обтяжений аллергоанамнез, рецидивні висипання на шкірі, рідкий стілець, здуття живота, кольки, зригування, неспокій після їжі, недостатні прибавки в масі тіла. 2-у групу склали 30 хворих з клінікою персистуючої кислої діареї, що розвилася після епізоду кишкової інфекції, застосування антибактеріальної терапії, переходу на штучне вигодовування. У відповідності зі стандартами діагностики у дітей цієї групи був виставлений діагноз вторинної лактазной недостатності. Група контролю - 20 умовно здорових дітей відповідного віку.
У всіх спостережуваних дітей в копрофильтратах визначали вміст кальпротектіна, зонуліна, еозинофільного катіонного протеїну, транстиретин, β-дефензіни 2. Дані маркери вивчали методом ензим-пов'язаного іммуносорбентний аналізу (ELISA - enzyme-linked immunosorbent assay) з використанням реактивів фірми Immundiagnostik. Розрахунки здійснювали шляхом побудови калібрувальної кривої за допомогою комп'ютерної програми. Результати статистичного аналізу приймалися як достовірні при p <0,05. Статистичну обробку матеріалу виконували за допомогою спеціалізованих пакетів прикладних програм для досліджень ( «Excel-2010» і «Statistica 6.0» for Windows).
Результати дослідження
Клінічний аналіз показав, що у дітей обох груп порушення кишкового всмоктування характеризувалося персистуючу діарею кислого характеру. У дітей 1-ї групи в 86% випадків (26 дітей) визначалися відрижки, у 20% пацієнтів (5 дітей) відзначалася 1-2-кратна блювота, 92% немовлят (27 дітей) турбували кишкові кольки. У клінічному аналізі крові у дітей цієї групи в 53% випадків (16 осіб) реєстрували анемію легкого та середнього ступеня тяжкості. 86% дітей (26 осіб) 2-ї групи також турбували відрижки, 97% немовлят (29 дітей) - кишкові кольки і здуття живота, в 26% випадків (8 дітей) відзначалися низькі надбавки в масі тіла. Анемія легкого ступеня тяжкості зафіксована у 23% пацієнтів (7 дітей). Копрологіческіеполіпи дослідження у пацієнтів обох груп виявили змішану стеаторею. Йодофильная флора, дисахара з різним ступенем вираженості визначалися в калі у всіх хворих. За даними ультразвукового дослідження органів черевної порожнини 19 дітей (40%) 1-ї групи мали ознаки реактивного ураження підшлункової залози у вигляді зниженої ехогенності паренхіми головки і хвоста органу. У 2-ї групи дітей при даному дослідженні відхилень від норми не виявлено.
При дослідженні копрофільтратах у пацієнтів обох груп і у здорових дітей ми отримали наступні результати, представлені в таблиці.
Ендогенні білки і протеїни в копрофильтратах у дітей з синдромом мальабсорбції
показники
I група
II група
контрольна група
Фекальний кальпротектін (нг / мл)
91,23 ± 21,05 *
26,72 ± 3,89 # ^
15,29 ± 3,47
Зонулін (нг / мл)
1,75 ± 0,16 *
1,16 ± 0,15 # ^
0,75 ± 0,01
Еозинофільний катіонний протеїн (нг / мл)
518,74 ± 63,17 *
176,93 ± 22,59 ^
192,50 ± 21,15
β-дефензіни (нг / мл)
39,12 ± 4,32 *
28,01 ± 3,74
21,96 ± 3,06
Транстиретин (нг / мл)
3,04 ± 0,39 *
2,07 ± 0,48
1,41 ± 0,25
де * - достовірність відмінностей p <0,05 між 1-ю групою і контрольною групою;
# - достовірність відмінностей p <0,05 між 2-ю групою і групою контролю;
^ - достовірність відмінностей p <0,05 між 1-й і 2-й групами.
В ході дослідження встановлено, що у дітей з алергічною ентеропатію і ЛН зміст кальпротектіна в копрофильтратах було достовірно вище, ніж у дітей контрольної групи (91,23 ± 21,05 нг / мл, 26,72 ± 3,89 нг / мл і 15 , 29 ± 3,47 нг / мл; р <0,01; р <0,05 відповідно), що свідчило про наявність структурно-функціональних змін клітин слизової оболонки тонкої кишки, більш виражених при алергічної ентеропатії.
Зміст зонуліна в копрофильтратах у пацієнтів обох груп визначалося на більш високому рівні в порівнянні з групою контролю (p <0,001; p <0,05 відповідно). У дітей 1-ї групи рівень даного пептиду в копрофильтратах перевищував показники, отримані у пацієнтів 2-ї групи з гиполактазия, в 2,3 рази. З огляду на, що молекули пептиду зонуліна беруть участь в забезпеченні щільних контактів між клітинами епітелію слизової оболонки кишечника, його гіперпродукція може сприяти каскаду реакцій, що призводять до розширення міжклітинних контактів і зростання проникності кишечника, що має місце при синдромі мальабсорбції будь-якого генезу [7]. Встановлене нами високий вміст даного маркера в копрофильтратах у пацієнтів з алергічною ентеропатію свідчить про більш глибоких, ніж при гиполактазии, структурні зміни слизової оболонки тонкої кишки.
При ураженні шлунково-кишкового тракту особливе місце займають лабораторні методи, що оцінюють пошкодження слизової оболонки кишечника шляхом визначення екскреції з калом біологічно активних речовин, що вказують на активність запального процесу, таких як еозинофільний катіонний протеїн [5]. У нашому дослідженні зміст еозинофільного катіонного протеїну визначалося на достовірно (р <0,001) високому рівні в порівнянні з показниками контрольної групи тільки у дітей з інтолерантності до білка коров'ячого молока, що може бути використано в складних діагностичних випадках у дітей в якості неінвазивного маркера алергічного запалення слизової оболонки кишечника.
При визначенні змісту β-дефензіни 2 в копрофильтратах виявлені певні закономірності. Так, тільки у дітей з явищами алергічної ентеропатії (1-я група) вміст β-дефензіни 2 перевищувало показники контрольної групи (р <0,01). В даний час встановлено, що основними продуцентами β-дефензіни в кишечнику є ентероцита слизової оболонки, макрофаги, дендритні клітини. Активація даних клітинних структур при запальних процесах призводить до швидкого звільнення дефензіни, що носить, очевидно, захисний характер і спрямоване на придушення активності кишкової бактеріальної флори [3]. Крім того, β-дефензіни мають імуномодулюючу дію, грають ключову роль в забезпеченні першої лінії захисту макроорганізму від чужорідних агентів, включаючи віруси [3]. У дітей 2-ї групи з явищами ЛН зміст β-дефензіни не відрізнялося від його рівня в копрофильтратах у здорових дітей. Це, ймовірно, пов'язано з тим, що при вторинної гиполактазии зміни слизової оболонки кишечника носять короткочасний транзиторний характер і не призводять до глибоких деструктивних змін клітинних структур кишкової стінки. У той же час при алергічної ентеропатії відбуваються більш глибокі і тривалі зміни, не тільки захоплюючі слизову оболонку тонкої кишки, а й призводять до активації неспецифічних захисних факторів гуморальної вродженої імунної системи.
Як показало наше дослідження, зміст транстиретин в копрофильтратах перевищувало рівень, спостережуваний у здорових дітей, тільки у хворих 1-ї групи (р <0,05). У клінічній практиці визначення транстиретин використовується для оцінки нутрітівного статусу [6]. Однак при супутньому запальному процесі така оцінка істотно ускладнена. Це пов'язано з тим, що транстиретин є чутливим білком гострої фази запалення. Таким чином, підвищення рівня даного білка в калі свідчить про запальних змінах в кишечнику, а втрати транстиретин створюють умови для розвитку білкової недостатності.
висновок
Проведене дослідження показало, що у дітей з алергічною ентеропатію (непереносимістю білка коров'ячого молока) в копрофильтратах підвищений вміст кальпротектіна, зонуліна, еозинофільного катіонного протеїну, β-дефензіни 2, транстиретин. У пацієнтів з непереносимістю лактози вторинного генезу у копрофільтатах відзначено достовірне збільшення вмісту тільки двох маркерів - кальпротектіна і зонуліна. Встановлена нами закономірність, яка свідчить про гіперпродукції еозинофільного катіонного протеїну, транстиретин, β-дефензіни 2 тільки у пацієнтів з алергічною природою мальабсорбції, може бути використана в клінічній практиці при диференціальної діагностики в складних випадках. Неінвазивний характер обстеження дозволяє використовувати визначення даних показників в копрофильтратах у дітей, в тому числі в наймолодших вікових групах. Отримані нами результати розширюють уявлення про патогенез синдрому мальабсорбції, дозволяють поліпшити діагностику захворювання, в тому числі неінвазивну, і можуть бути рекомендовані для використання в клінічній практиці. Впровадження даних методів дозволить поліпшити прогноз захворювання і можливості адекватної терапії порушення кишкового всмоктування.
рецензенти:
Круковіч Е.В., д.м.н., професор, завідувач кафедри факультетської педіатрії ГБОУ ВПО «Тихоокеанський державний медичний університет МОЗ Росії», г. Владивосток;
Шапкина Л.А., д.м.н., професор кафедри факультетської терапії, головний позаштатний дитячий ендокринолог Приморського краю ГБОУ ВПО «Тихоокеанський державний медичний університет МОЗ Росії», г. Владивосток.
бібліографічна посилання
Шуматова Т.А., Зернова Е.С., Григорян Л.А., Шишацька С.Н. Антимікробних пептиди І БІЛКИ В ДІАГНОСТИЦІ синдромоммальабсорбції У ДІТЕЙ // Сучасні проблеми науки та освіти. - 2015. - № 3 .;
URL: http://www.science-education.ru/ru/article/view?id=20324 (дата звернення: 20.06.2019).
Пропонуємо вашій увазі журнали, що видаються у видавництві «Академія природознавства»
(Високий імпакт-фактор РИНЦ, тематика журналів охоплює всі наукові напрямки)
Ru/ru/article/view?
