Роль кальцію, вітаміну D3 і остеотропних мінералів в профілактиці і комплексному лікуванні перелому гомілкової кістки: результати рандомізованого плацебо

1. Матеріали і методи дослідження
2. Визначення колагену в зразках кісткової тканини
3. Результати та обговорення
4. Висновок

На сьогоднішній день відзначається зростання частоти ушкоджень органів опорно-рухового апарату і тканин. Цьому сприяють природні і антропогенні катастрофи, бурхливий розвиток всіх видів транспорту, що обумовлює високий травматизм в мирний час. Під час збройних конфліктів, терористичних актів відсоток травматизму зростає в рази. Дані обставини вимагають від лікарів надійних засобів, методів і результатів лікування.

Протягом багатьох років механічні властивості кісткової тканини, а також механізми, що лежать в основі їх змін при різних захворюваннях, становлять значний науковий і медичний інтерес. Знання цих механізмів дозволяє детальніше заглибитися в процеси патогенезу захворювань опорно-рухової системи людини, що відкриває нові перспективи не тільки в питаннях профілактики і лікування таких патологій, як остеоартроз великих і дрібних суглобів, асептичний некроз кісток, але і в реабілітації після переломів [1] .

Центральним механізмом репарації кісткової тканини є формування кісткового матриксу, структурною основою якого є колагенові волокна. Кістковий матрикс, який є основою для засвоєння кальцію скелетом, на 90% складається з колагену 1-го типу. В активну фазу репарації кістки відзначається підвищення синтезу колагену 3-го типу. Оскільки синтез колагену будь-якого типу залежить від забезпеченості організму поруч остеогенних мікронутрієнтів, то і час репаративного остеогістогенеза після перелому, і якість зрощення кістки істотно залежать не тільки від кальцію і вітаміну D, але також від остеогенних мікронутрієнтів: цинку, марганцю, бору, міді, магнію . Однак, незважаючи на численні публікації з патофизиологическим обґрунтуванням ролі зазначених мікронутрієнтів в метаболізмі кісткової тканини, до теперішнього часу були відсутні як експериментальні, так і клінічні дані, що підтверджують їх вплив в складі лікарських засобів на колаген і інші компоненти органічного матриксу кістки, особливо в ході регенерації після переломів. Це дослідження є спробою в якійсь мірі заповнити цю прогалину. Як досліджуваного препарату було обрано доступне на вітчизняному ринку лікарський засіб Кальцемин Адванс, призначене для підвищення забезпеченості організму остеогенними мікронутрієнтів.

Матеріали і методи дослідження

Метою нашого дослідження було вивчення вплив препарату Кальцемін Адванс на регенерацію, біомеханічні властивості і вміст колагену в кістковій тканині після перелому гомілкової кістки. До початку експерименту було отримано дозвіл етичного комітету ГБОУ ВПО ІвГМА на проведення даного дослідження від 6.09.2014 р

Для досягнення поставленої мети вирішувалися наступні завдання: 1) формування контрольних і дослідних груп об'єктів дослідження (капюшон щури) за принципом однорідності; 2) проведення операції; 3) зондування щурів КАЛЬЦЕМІН Адванс (дослідна група) і водою (контрольна група); 4) відстеження динаміки регенерації, включаючи оцінку біомеханічних властивостей кістки; 5) оцінка рівнів колагену 1-го і 3-го типу в кістки; 6) оцінка гістологічної картини кісткової тканини в місці перелому (кісткової мозолі).

Відбір щурів здійснювався за наступними критеріями: в дослідження були включені здорові тварини (блискучі очі; шкірні покриви чисті, без видимих ​​пошкоджень, густий, блискучий хутро), активні, з хорошим апетитом, вік близько 1 року, вагою від 280 до 350 грам. При входженні в експеримент проводилося зважування тварин на електронних вагах. Дані про кожну тварину заносилися в таблицю із зазначенням номера, ваги, особливостей забарвлення і інших показників. Кожна щур маркувалася пікринової кислотою в міру входження в експеримент, після чого було вироблено відсаджування експериментальних щурів в окремі клітини.

Безпосередньо перед операцією проводили контрольне зважування і оцінку фізичного стану тварин. Як знеболюючий засіб використовували хлоралгидрат (350 мг / кг внутрішньоочеревинно). Після введення в наркоз тварина фіксувалося в верстаті, в області стегна правої задньої кінцівки віддалявся волосяний покрив, на стегні розсікали тканини, оголювалася малоберцовая кістка, після чого проводився контрольований перелом кістки. Потім краї рани стягувалися і зашивались безперервним швом, на лапу тварини накладалася шина. Потім кожен щур містилася в окрему клітку; всім тваринам забезпечувалися однакові умови (доступ до води, стандартний раціон віварію, однакова освітленість і режим провітрювання).

Зондування препаратом і контроль регенерації проводилися 5 разів на тиждень протягом 30 днів. З першого дня після операції проводилися вимірювання площі перелому в контрольній і дослідній групах, потім проводилося зондування препаратом або водою. Контрольна група (n = 30) отримувала воду (3 мл), досвідчена група (n = 30) - препарат Кальцемін Адванс з розрахунку 0,1 мл суспензії на кілограм маси тіла. Для порівнянь також використовувалися дані про стан кісткової тканини тварин в интактном контролі (без перелому, n = 10).

Навішування препарату готувалися на електронних вагах. На 31-й день тварин всіх груп виводили з експерименту. Через добу після останнього прийому Кальцемін Адванс щурів декапітованих (під наркозом з використанням хлоралгідрату в дозі 700 мг / кг внутрішньоочеревинно). Потім иссекали область перелому і проводили фарбування кісткової тканини в місці перелому спеціальними методиками з подальшим приготуванням мікросрезов кістки в місці перелому для гістологічної оцінки і вивчали рівні колагену в кістковій тканині в місці перелому в групі 1 і 2.

Визначення колагену в зразках кісткової тканини

Визначення колагену (загального, 1-го або 3-го типів) в тканинах зазвичай проводиться шляхом розчинення колагену за допомогою пептідаз (QuickZyme, Chondrex і ін. Методики). Однак даний метод непридатний для визначення колагену в кістки, т. К. Пептідази розчиняють не більше 10-12% колагену в кістки. Тому для оцінки генового метаболізму при оцінці загоєння кістки після перелому доцільно використовувати иммуногистохимический аналіз.

Для імуногістохімічної оцінки експресії колагену 1-го і 3-го типу депарафінізірованние зрізи кістки промивали натрій-фосфатним буфером, інкубували з 0,3% перекисом водню протягом 20 хв, щоб блокувати активність ендогенної пероксидази з подальшою інкубацією з 5% бичачого сироваткового альбуміну. Потім зрізи інкубували з оптимальними концентраціями первинних антитіл для COL-I (1: 100; Sigma Aldrich, Сент-Луїс, США) протягом ночі при 4 ° С. Після три рази промивали натрій-фосфатним буфером, зрізи інкубували з біотінілірованние вторинними антитілами протягом 20 хв перед інкубацією з кон'югованим з пероксидазою хрону авідінбіотіновим комплексом протягом ще 20 хв. Іммуноокрашіваніе візуалізували після додавання 3,3-діамінобензідін тетрагідрохлоріда. Потім зрізи забарвлюється гематоксиліном Харріса протягом 40 сек, в межах від 3 хв полоскань з проточною водою. Зрізи збезводнювали розчинами етанолу підвищуються концентрацій і очищали в ксилолі. Зразки були досліджені під світловим мікроскопом Olympus (Японія). Для підтвердження результатів кожен експеримент був повторений принаймні три рази. Регенерація кістки на цих гістологічних зрізах оцінювалася по полуколичественной бальною шкалою за допомогою модифікованого методу підрахунку балів [2]. Число остеокластів підраховували під світловим мікроскопом.

Результати та обговорення

Дослідження показало, що включення препарату в стандартну терапію перелому гомілкової кістки призводить до поліпшення біомеханічних властивостей кістки, збільшення швидкості і якості формування кісткової мозолі. Крім того, методами імуногістохімії було встановлено підвищення синтезу колагену 1-го і 3-го типу в зоні зрощення перелому. Відповідно до рандомізованих дизайном дослідження, всі ці ефекти слід відносити саме до прийому препарату Кальцемін Адванс.

Для оцінки впливу Кальцемін Адванс на біомеханічні властивості кістки вимірювалися такі параметри, як питома стріла прогину, межа міцності, модуль пружності, і обчислювалася т. Н. «Робота руйнування» кістки. На 30-й день значення питомої стріли прогину склали 3,20 ± 0,12 НмкМ (Кальцемін Адванс) і 2,86 ± 0,10 НмкМ в контрольній групі (р <0,03, рис. 1а).

Значення інших показників біомеханічної міцності кістки також були підвищені у тварин в дослідній групі. Прийом препарату підвищував межа міцності (досвід - 218 ± 8 гПа, контроль - 198 ± 6 гПа, p <0,05, рис. 1б), модуль пружності (досвід - 6,12 ± 0,25 гПа, контроль - 5,12 ± 0,44, p <0,01, рис. 1в), роботу руйнування (досвід - 182 ± 12 мДж, контроль - 141 ± 8 мДж, p <0,05, рис. 1г). Такі зміни біомеханічних параметрів слід інтерпретувати як зниження крихкості кістки на тлі збільшення міцності і еластичності.

Зауважимо, що в роботі, проведеної раніше в Луганському медичному університеті на самках білих щурів похилого віку (18-24 міс), були встановлені порівнянні значення приросту показників при прийомі Кальцемін в порівнянні з контролем. Так, середнє збільшення питомої стріли прогину склало + 0,39 НмкМ, межі міцності - + 11 гПа, модуля пружності - + 0,45 гПа, роботи руйнування - + 14 мДж [3].

Таким чином, прийом препарату Кальцемін Адванс достовірно (в порівнянні з контролем) стимулює підвищення міцності кістки. На наш погляд, це пов'язано з надходженням в організм не тільки кальцію і вітаміну D3, а й інших остеогенних мінералів, які грають есенційну роль в метаболізмі кісткової тканини. Аналіз зміни модуля пружності і питомої стріли прогину підтверджує наявність тенденції до оптимізації структури саме органічного компонента (т. Е. Колагену) в основній групі, що проявляється в збільшенні еластичності і гнучкості кісткової тканини. Причиною цього є надходження в організм, перш за все, міді і марганцю, які беруть участь в синтезі колагену. Метаболізм цих нутрієнтів тісно пов'язаний з метаболізмом магнію. Дефіцит магнію призводить до розрідження кісткової тканини, аж до утворення порожнин. Це може бути пов'язано з участю магнію в синтезі колагену в складі кісткового матриксу [8, 21].

Мідь бере участь в модифікації певних лізінових залишків колагену і еластину, що має важливе значення для формування колагенових і еластинових фібрил. Одним з факторів, що сприяють втраті кісткової маси, є субклінічні дефіцити цинку і міді, що виникають внаслідок зменшеного споживання або порушень всмоктування цих мікроелементів в організмі. Недолік міді у людини і у тварин пов'язаний з порушеннями росту, остеогенеза і крихкістю кісток, що багато в чому обумовлено недостатньою кількістю цих поперечних зшивок. В експерименті дефіцит міді приводив до порушення структури колагену і зниження таких механічних властивостей кістки, як максимальний стійкий крутний момент, кінцева кутова деформація і міцність (р <0,05) [4, 5].

Дефіцит міді погіршує формування зшивок колагену і призводить до важкої патології кісток, легенів і серцево-судинної системи. Мідь, будучи кофактором ферменту лізілоксідази (ген LOX), має важливе значення для формування внутрішньо-і міжмолекулярних поперечних зв'язків в коллагене. Тривимірна мережу сполучної тканини поперечно-смугастих м'язів складається, в основному, з ниток колагену.

У тварин на мідь-дефіцитної дієті структура цієї мережі порушується саме внаслідок зниження активності лізілоксідази [6, 7]. Зниження активності при низькому вмісті міді в дієті призводить до зниження числа поперечних зшивок ниток колагену і до погіршення показників механічної міцності кістки (рис. 2).

Встановлене в цьому дослідженні поліпшення гібкостних характеристик кістки (питома стріла прогину, модуль пружності) при прийомі Кальцемін Адванс пов'язано не тільки з наявністю міді в складі даного препарату, а й з наявністю марганцю. Марганець - есенціальний мікроелемент і кофактор більше 200 білків. До клінічних симптомів марганцевого дефіциту відносяться підвищена крихкість кісток, порушення освіти хрящової тканини, аномалії розвитку скелета, затримка росту волосся і нігтів. Ефекти довгострокового дефіциту марганцю і міді в дієті включають зниження мінералізації в поєднанні зі збільшенням резорбції кістки [8, 21].

Хронічний дефіцит марганцю і міді призводить до зниження активності будують кістку остеобластів, збільшення резорбції кісткового матриксу та, отже, зниження щільності і маси кісток. В експерименті недостатність міді і марганцю приводила до значного зниження вмісту кальцію в кістки (180 мг / г, дефіцит Mn / Cu і 272 мг / г, контроль), причому вміст кальцію в кістки було обернено пропорційно концентрації кальцію в сироватці (r = -0 , 69, p <0,01).

Рентгенограми плечових кісток вказали на присутність численних вогнищ ушкодження кістки як при одночасному дефіциті Mn / Cu, так і при глибокому дефіциті марганцю [8, 21].

Ефекти марганцю на сполучну тканину обумовлені впливом дефіциту марганцю на структуру т. Н. «Гелеобразной середовища», цього найважливішого компонента сполучної тканини. Гелеподібна серед освічених протеогликанами - надзвичайно розтягнутими поліпептидними ланцюгами з численними полісахаридними ланцюгами глюкозаміногліканів, приєднаних за допомогою ковалетних зв'язків. Численні ланцюга протеогликанов прикріплюються до особливого виду глюкозаминогликан - полімеру гіалуронової кислоти, званому гіалуронаном. Нитки гіалуронана скріплюють структуру гелю в єдине ціле, і цей полісахаридних «гель» може протистояти стисненню і розтягуванню внутрішньоклітинного матриксу і в той же час забезпечує швидку дифузію поживних речовин, будівельних матеріалів і гормонів між кров'ю і клітинами сполучної тканини. Механічно структура гелю посилена за допомогою колагенових і еластинових волокон.

Встановлено щонайменше три різновиди марганець-залежних ферментів, які беруть участь в синтезі глюкозаміногліканів та інших вуглеводних компонентів протеогліканів. До цих ферментів відносяться галактозілксілозіл глюкуронілтрансфераза, бета-галактозілтрансферази і N-ацетілгалактозамініл-трансферази. Галактозілксілозіл глюкуронілтрансфераза (гени B3GAT1, 2, 3) відіграють важливу роль в біосинтезі таких гликозаминогликанов, як хондроїтин сульфат, дерматан сульфат, гепаран сульфат і гепарин. Бета-галактозілтрансферази (гени B4GALT1, 2, 3, 4, 5, 6, 7) беруть участь в біохімічних модифікаціях і приєднання глюкозаміногліканів, і активність цих ферментів значно впливає на структуру позаклітинної матриці СТ.

N-ацетілгалактозамінілтрансферази (гени GALNT1, 2, ..., 15) необхідні для синтезу глюкозаминогликан хондроитин сульфату. Хондроітин сульфат складається з повторюють дісахардних послідовностей N-ацетілгалактозамінових і глюкоуроновой залишків, і даний фермент приєднує N-ацетілгалактозаміни до зростаючої полисахаридной ланцюга. Марганець-залежні N-ацетілгалактоз-амінілтрансферази необхідні для нормальної осифікації [9] і нормального розвитку хряща. Дефіцит марганцю призводить до руйнування конформації активного центру і різкого падіння активності ферменту [10].

Крім впливу на біомеханічні властивості кістки, прийом препарату Кальцемін Адванс приводив до істотного скорочення термінів повної консолідації гомілкової кістки. У щурів контрольної групи в ході спостереження повна консолідація перелому гомілкової кістки досягалася на 12-13 день експерименту (12,5 ± 2,1 дня). При прийомі препарату консолідація перелому гомілкової кістки відбувалася на 7-8 день експерименту (7,4 ± 2,2 дня), т. Е. В 1,6 рази швидше, ніж в групі контролю (р = 0,006).

За завершенні експеримент такоже проводити гістологічне дослідження якості тканини в кісткової мозолі у всех піддослідніх тварин. Результати імуногістохімічного АНАЛІЗУ зразків кісткі в області перелому вказано на підвіщене Накопичення колагену 1-го и 3-го типу в області шва в основній групі, что корелює з прискореного зрощеній кісткі и поліпшенням якості кісткової мозолі. Інтенсівність иммуногистохимического фарбування зразків тканин на колаген в контрольній групі булу Досить невісока, тканини характерізувалася розрідженій структурою. У порівнянні з даними для інтактного контролю (без перелому), прийнятими за 100%, інтенсивність фарбування на колаген 1-го типу склала 67 ± 16% в контрольній групі. У той же час інтенсивність фарбування на колаген 1-го типу склала 89 ± 12% при прийомі Кальцемін Адванс (р = 0,05). Таким чином, Кальцемін Адванс містить остеотропні мінерали: цинк, мідь, магній, марганець і бор, які сприяють синтезу колагену 1-го і 3-го типу.

Крім міді та марганцю, які необхідні для синтезу кісткового матриксу та колагену, мають важливе значення цинк і бор. Цинк і бор - принципово важливі кофактор ферментів, які беруть участь в синтезі різних молекулярних компонентів матриксу кісткової тканини [11]. Цинк необхідний для підтримки і диференціювання остеобластів і синтезу колагену. Також він регулює рівень інсуліноподібний фактор росту (ІФР-1). Дефіцит цинку призводить до порушення синтезу ДНК і метаболізму білка, що веде до порушення синтезу органічного матриксу [12].

Бор, який також входить до складу препарату Кальцемін Адванс, робить істотний вплив на процеси росту клітин кісткової тканини. Так, бор підвищує одонтогенну і остеогенних диференціювання клітин паростка стовбурових клітин дентину [13]. Бор дозозависимо впливає на процеси диференціювання стромальних клітин кісткового мозку. Концентрації бору в 1, 10 і 100 нг / мл підвищували, а рівні понад 1000 нг / мл інгібували диференціювання клітин (р <0,05). При рівнях бору в 10 ... 100 в живильному середовищі культури клітин кісткового мозку також підвищувалися рівні білків остеогенеза - остеокальцину, колагену 1-го типу, білків морфогенезу кісток 4, 6 і 7 (р <0,05) [14], а також остеопонтіна і сіалопротеіна кістки [15]. Таким чином, накопичені дані свідчать про значний вплив бору на синтез колагену і формування кісткового матриксу.

Бор впливає на процеси депонування кальцію в кістковій тканині. Прийом експериментальної дієти, що містить бор в кількості 3 мг / кг, протягом 20 днів призводив до підвищення площі мінералізації кістки, загальною площею кістки і числа остеобластів [16]. Гістоморфометріческое дослідження ефектів глибокого харчового дефіциту бору (норма - 3 мг B / кг їжі, експериментальна В-дефіцитна дієта - 0,07 мг B / кг) вказало на порушення структури альвеолярної кістки пародонта [17]. У нормі зрілі кубічні остеобласти вистилали 52 ± 9% поверхні кістки, при дефіциті бору - тільки 19 ± 10%.

Порівняльний експериментальний аналіз групи тварин, які брали тільки 300 мг / сут кальцію, в порівнянні з групою, яка приймала кальцій в поєднанні з 2 мг / сут бору, показав, що додавання бору сприяло досягненню найвищої механічної міцності кісткової тканини [18].

Певний рівень фізичної активності може бути необхідний для здійснення позитивних ефектів бору на кісткову тканину. В експерименті прийом 50 мг / кг бору в формі тетрабората натрію (Na2B4O7) на тлі інтенсивного курсу тренування на біговій доріжці приводив до достовірного збільшення хребетної і стегнової кісткової маси. Довжина стегна, ступінь мінералізації та щільність кістки, обсяг трабекулярної кістки і товщина губчастої були значно вище при прийомі бору (р <0,005) [19]. Прийом препаратів бору в групі спортсменок приводив до збільшення мінеральної щільності кісткової тканини, в той час як в групі учасниць, які ведуть малорухливий спосіб життя, навпаки, відзначено зниження МПК [20].

Висновок

Можливості повного заповнення дефіцитів мікроелементів, необхідних для функціонування кісткової тканини (насамперед, для синтезу колагену і, отже, кісткового матриксу) істотно розширюються при використанні спеціальних мікронутріентной препаратів, наприклад препарату Кальцемін Адванс. Магній, марганець, мідь, цинк і бор прийнято називати остеогенними елементами. У даній роботі експериментально показано, що одночасний прийом кальцію з цими остеогенними елементами і вітаміном D сприяє поліпшенню і прискоренню темпів зрощування гомілкової кістки після перелому. Остеогенні елементи сприяють синтезу колагену 1-го і 3-го типу і, як наслідок, синтезу повноцінного кісткового матриксу.

література

1. Кукін І. А., Кирпічев І. В., Маслов Л. Б., Віхров С. В. Особливості міцності губчастої кістки при захворюваннях тазостегнового суглоба // Росс. мед. журнал. 2013, № 7, 328-333.
2. Mankani MH, Kuznetsov SA, Avila NA, Kingman A., Robey PG Bone formation in transplants of human bone marrow stromal cells and hydroxyapatitetricalcium phosphate : prediction with quantitative CT in mice // Radiology. 2004; 230: 369 e76.
3. Лузін В. І., Скляніна Л. В., Афонін Д. Н., Нехорошев М. В. Біомеханічні характеристики скелета самок білих щурів старечого віку при застосуванні препарату Кальцемін // У.М.Ж. 2003 6 (2): 100-103.
4. Jonas J., Burns J., Abel EW, Cresswell MJ, Strain JJ, Paterson CR Impaired mechanical strength of bone in experimental copper deficiency // Ann Nutr Metab. 1993; 37 (5): 245-252.
5. Opsahl W., Zeronian H., Ellison M., Lewis D., Rucker RB, Riggins RS Role of copper in collagen cross-linking and its influence on selected mechanical properties of chick bone and tendon // J Nutr. 1982; 112 (4): 708-716.
6. Kaitila II, Peltonen L., Kuivaniemi H., Palotie A., Elo J., Kivirikko KI A skeletal and connective tissue disorder associated with lysyl oxidase deficiency and abnormal copper metabolism // Prog Clin Biol Res. 1982; 104: 307-315.
7. Borg TK, Klevay LM, Gay RE, Siegel R., Bergin ME Alteration of the connective tissue network of striated muscle in copper deficient rats // J Mol Cell Cardiol. 1985; 17 (12): 1173-1183.
8. Strause LG, Hegenauer J., Saltman P., Cone R., Resnick D. Effects of long-term dietary manganese and copper deficiency on rat skeleton // J Nutr. 1986; 116 (1): 135-141.
9. Sato T., Kudo T., Ikehara Y., Ogawa H., Hirano T., Kiyohara K., Hagiwara K., Togayachi A., Ema M., Takahashi S., Kimata K., Watanabe H., Narimatsu H . Chondroitin sulfate N-acetylgalactosaminyltransferase 1 is necessary for normal endochondral ossification and aggrecan metabolism // J Biol Chem. 2011 року; 286 (7): 5803-12 doi.
10. Watanabe Y., Takeuchi K., Higa Onaga S., Sato M., Tsujita M., Abe M., Natsume R., Li M., Furuichi T., Saeki M., Izumikawa T., Hasegawa A., Yokoyama M., Ikegawa S., Sakimura K., Amizuka N., Kitagawa H., Igarashi M. Chondroitin sulfate N-acetylgalactosaminyltransferase-1 is required for normal cartilage development // Biochem J. 2010 року; 432 (1): 47-55 doi.
11. Kaitila II, Peltonen L., Kuivaniemi H., Palotie A., Elo J., Kivirikko KI A skeletal and connective tissue disorder associated with lysyl oxidase deficiency and abnormal copper metabolism // Prog Clin Biol Res. 1982; 104: 307-315.
12. Naghii MR, Torkaman G., Mofid M. Effects of boron and calcium supplementation on mechanical properties of bone in rats // Biofactors. 2006; 28 (3-4): 195-201.
13. Tasli PN, Dogan A., Demirci S., Sahin F. Boron enhances odontogenic and osteogenic differentiation of human tooth germ stem cells (hTGSCs) in vitro // Biol Trace Elem Res. 2013; 153 (1-3): 419-427 doi.
14. Ying X., Cheng S., Wang W., Lin Z., Chen Q., Zhang W., Kou D., Shen Y., Cheng X., Rompis FA, Peng L., Zhu Lu C. Effect of boron on osteogenic differentiation of human bone marrow stromal cells // Biol Trace Elem Res. 2011 року; 144 (1-3): 306-315 doi.
15. Hakki SS, Bozkurt BS, Hakki EE Boron regulates mineralized tissue-associated proteins in osteoblasts (MC3 T3-E1) // J Trace Elem Med Biol. 2010 року; 24 (4): 243-250 doi.
16. Uysal T., Ustdal A., Sonmez MF, Ozturk F. Stimulation of bone formation by dietary boron in an orthopedically expanded suture in rabbits // Angle Orthod. 2009 року; 79 (5): 984-490 doi.
17. Gorustovich AA, Steimetz T., Nielsen FH, Guglielmotti MB A histomorphometric study of alveolar bone modelling and remodelling in mice fed a boron -deficient diet // Arch Oral Biol. 2008; 53 (7): 677-682 doi.
18. Naghii MR, Torkaman G., Mofid M. Effects of boron and calcium supplementation on mechanical properties of bone in rats // Biofactors. 2006; 28 (3-4): 195-201.
19. Rico H., Crespo E., Hernandez ER, Seco C., Crespo R. Influence of boron supplementation on vertebral and femoral bone mass in rats on strenuous treadmill exercise . A morphometric, densitometric, and histomorphometric study // J Clin Densitom. 2002; 5 (2): 187-192.
20. Meacham SL, Taper LJ, Volpe SL Effects of boron supplementation on bone mineral density and dietary , blood, and urinary calcium, phosphorus, magnesium, and boron in female athletes // Environ Health Perspect. 1994; 102 Suppl: 79-82.
21. Parlier R., Hioco D, Leblanc R. Metabolism of magnesium and its relation to that of calcium . I. Apropos of a study of magnesium balance in the normal man, in osteopathies and nephropathies // Rev Fr Endocrinol Clin. 1963; 4: 93-135.

В. І. Демидов *, кандидат медичних наук
Н. Ю. Жідоморов *, кандидат медичних наук
О. А. Громова *, 1, доктор медичних наук, професор
І. Ю. Торшин **, кандидат хімічних наук
А. Ю. Волков **
В. Н. Носиков ***, кандидат хімічних наук

* ГБОУ ВПО ІвГМА МОЗ РФ, Іваново
** РСЦ Інституту мікроелементів ЮНЕСКО при РНІМУ ім. Н. І. Пирогова, Москва
*** ВНДІ агрохімії ім. Д. Н. Прянишникова РАСН, Москва

1 Контактна інформація: [email protected]

Купити номер з цією статтей в pdf