Меню 
Гонадотропних гормонів нівелює інгібуючого ефекту АНГІОТЕНЗИНУ II НА ДОЗРІВАННЯ ООЦИТІВ
Гонадотропних гормонів нівелює інгібуючого ефекту АНГІОТЕНЗИНУ II НА ДОЗРІВАННЯ ООЦИТІВ ВЕЛИКОЇ РОГАТОЇ ХУДОБИ IN VITRO
Сметаеіва І.Г., Татарпнова Л.В.
Всеросійський науково-дослідний інститут фізіології, біохімії та харчування сільськогосподарських тварин РАСГН
Боровськ Калузької обл .. 249013, Росія
КРИВОХАРЧЕНКО А.С.
Max-Dellbruk Center for Molecular Medicine (MDC) D-13092 Berlin-Buch, Germany
Вступ. Більшість факторів, що діють на процес дозрівання ооцитів in vivo невідомі, тому відтворити поза орга-нізму умови дозрівання неможливо. Як наслідок, ефективність дозрівання і якість ооцитів, дозрілих in vitro нижче, ніж in vivo. Тому дуже важливо ідентифікувати ці чинники, з тим, щоб можна було додавати їх в культуральну систему in vitro.
Ренін-ангіотензинової системи (RAS) включає ангіотензин II (Angll) і його різні рецептори. Angll - активний октапептид, головний функціональний тип в RAS. Відомо, що RAS грає багато ролей в організмі ссавців, включаючи регуляцію кров'яного тиску, метаболизацию солей і води, підтримання балансу рідко-сти в організмі, і стимуляцію проліферації клітин гладкою Муск-Латур. До того ж, є переконливі дані, що RAS пред-ставлена в яєчниках ссавців і грає важливу роль в синтезі і секреції простагландинів і естрогенів, регуляції росту фолліку-лов, овуляції і атрезії.
Значні міжвидові відмінності, що стосуються експресії і клітинної локалізащш Angll рецепторів в оваріальних фолікулах, підтверджують відмінності серед видів в фізіологічної ролі RAS. Ро.ль Angll в дозріванні ооцитів великої рогатої худоби (ВРХ) изу-Чена недостатньо в порівнянні з іншими видами.
Мета роботи - оцінити вплив різних концентрацій Angll на ядерне і цитоплазматическое дозрівання ооцитів ВРХ in vitro в без-білкової середовищі MEM-альфа з гормонами або без них.
Матеріал і методика досліджень. Отримання ооцитів, їх со-зреваніе, запліднення і культивування здійснювали так, як нами було описано раніше [2, 1, 3] з деякими модифікаціями. У першій серії експериментів в середу дозрівання МЕМ-апьфа з гормо-нами (1мкг / мл гипофизарного свинячого фолікулостимулюючого гормону, "ФСГ-супер", ТОВ "Агробіомед", ВНІІФБіП с / г тварин, і 0.3 од / мл хоріонічного гонадотропіну людини, ХГЧ . "Мос-ковський ендокринний завод") додавали Angll ( "Sigma", США) в концентраціях 10-11, 10-9, 10-7М; в другій серії експериментів в середу MEM-альфа без гормонів додавали Angll в концентрації 10-7М.
Результати досліджень та їх обговорення. Отримані нами ре-зультати показують, що Angll в концентраціях 10-11, 10-9, 10-7Мне впливає на ядерне дозрівання ооіітов ВРХ in vitro в тому випадку, якщо в середу дозрівання додані гормони (57,1% в контро-ле vs 64,6% в досвіді; 60,8% vs 58,6%; 65,2% vs 66,7%, соответствен-но).
Однак, якщо в середу дозрівання гормони не додавалися. Angll в концентрації 10-7М достовірно інгібпровал виділення першого по-лярного тільця (43,6% в контролі vs 29,3% в досвіді, Р <0,05). Це поз-воляет зробити попередній висновок, що гонадотропні гормони нівелюють пнгібірующій ефект Angll на ядерне дозрівання оо-цитов in vitro.
В окремій серії експериментів нами не було виявлено впливу Angll, доданого в концентрації 10-7М в середу MEM-альфа з гір-монами на цігоплазматіческое дозрівання ооцитів ВРХ, критерієм якого був розвиток ембріонів до премплантацпонних стадій - не було різниці між контрольною та дослідною групою ні за відсотком початкового дроблення (61,1% vs / 61.5%), ні по відсотку ембріонів, які досягли стадії морули / бластоцисти (20% vs 16,7%).
Наші дані не узгоджуються з результатами Giometti et al. [6], ко-торие показують, що Angll в трьох аналогічних концентраціях, в середовищі 199HEPES без гормонів не впливав на дозрівання оо-цитов ВРХ in vitro. За даними цих авторів Angll не діє напря-мую на ооцити ВРХ, а тільки через фолікулярні клітини (клітини теки), пракпгческі повністю анулюючи інгібуючий ефект по-следних на дозрівання ядра. Цей факт пояснюється авторами тим, що Angll-рецептори (ATI і АТ2) були знайдені саме в клітинах теки ВРХ, але не в гранульозних клітинах [5, 4]. У той же час у свиней один підтип AngII-рецепторів (ATI) був знайдений як в зоні пеллюціда, так і в гранульозних клітинах [7] і Angll в концентрації 10-7М в середовищі з гормонами стимулював ядерне і цітоплазмат1гческое дозрівання ооцитів цього виду тварин.
Висновок. Таюгм чином, що складається на даний момент картина, представляється досить суперечливою. Механізм дей-наслідком Angll на дозрівання ооцитів ВРХ до кінця неясний. Питання про перспективи використання Angll в якості становить компо-нента культуральних середовищ залишається відкритим, потрібні подальші розширені дослідження.
ЛІТЕРАТУРА
1. КРИВОХАРЧЕНКО А.С., Сметаніна І.Г .. Татаринова Л.В. Запліднення і подальший розвиток ооцитів великої рогатої худоби після скороченою інкубації зі сперматозоїдами // Онтогенез. 2001. Т. 32. № 4. С. 283-287.
2. Сметаніна І.Г .. Татаринова Л.В., КРИВОХАРЧЕНКО А.С. Вліяьше складу культуральних середовищ на дозрівання ооцитів і розвиток ембріонів великої рогатої худоби in vitro // Онтогенез. 2000. Т.31. № 2. С. 139-143.
3. Сметаніна І.Г .. Татаринова Л.В .. КРИВОХАРЧЕНКО А.С. Запліднення ооцитів великої рогатої худоби Lu vitro в безбілкової культуральной системі / Юнтогенез. 200б.Т.37.№6.С.438-443.
4. Acosta TJ. Bersha В., Ozawa Т. et al. Evidence for a local endotheiiii-angiotensinatrial natriuretic peptide system in bovine mature follicles in vitro: effects on steroid hormones and prostaglandrn secretion // Biol. Reprod. 1999. V.61.P.1419-25.
5. Brunswig- Spickenheier B .; Mukhopadhyay AK Characterization of angiotensin П receptor subtype on bovine thecal cells and its regulation by luteinizing horrnone // Endocrinology. 1992.V.131.P.1445-52.
6. Giometti JC Bertagnolli AC, Ornes RC et al. Angioteusin П reverses the inhibitory action produced by theca cells on bovine oocyte nuclear maturation // Theriogenology. 2005. V.63.P. 1014-25.
7. Li YH, Jiao LH. Liu RH et al. Localization of angiotensin П in pig ovary and its effects on oocyte maturation in vitro // Theriogenology.2004. V.61. P. 447-59. 1. комп'ютері. Для професіоналів / В. Боровиков. - СПб. : Пітер. 2001. - 656 с.
Матеріали міжнародної науково-практичної конференції, присвяченої 75-річчю від дня народження
і 50-річчя науково-практичної діяльності доктора ветеринарних наук, професора Г. Ф. Медведєва.
горки БГСХА
Реклама на сайті
