1 Нестеров М.І. 1 Кривохижина Л.В. 1 Єрмолаєва Е.Н. 1 Кантюков С.А. 1
1 Федеральне державне бюджетне освітня установа вищої освіти «Південно-Уральський державний медичний університет» Міністерства охорони здоров'я Російської Федерації
У крові досліджували тригліцериди, фосфоліпіди, загальний холестерин, холестерин в ліпопротеїнів з розрахунком коефіцієнта атерогенності при гострій крововтраті різного ступеня тяжкості на 24-й, 48-й, 72-й і 120-а година постгеморагічного періоду. На основі дисперсійного аналізу визначали вплив ступеня, терміну крововтрати, а також їх поєднаної дії. Гостру масивну крововтрату моделювали за методикою Луценко (1961) в обсязі 0,5%, 1%, 2% від маси тіла. При крововтраті будь-якого ступеня тяжкості в постгеморрагическом періоді розвивається дислипидемия. Будь-яка крововтрата має проатерогенного властивостями. Динаміка коефіцієнта атерогенності (КА) в постгеморрагіческій період не відповідає динаміці змін ОХ в крові. Прояви дисліпідемії залежні від ступеня, терміну крововтрати, поєднання їх дії, виду ліпідів. Найбільший вплив на зміну ліпідного профілю крові надає сумарну дію організованих факторів (ступінь, термін крововтрати, їх поєднане дію): для фосфоліпідів 59%, для загального холестерину 55%, для тригліцеридів 32%. З них в більшій мірі впливають: на фосфоліпіди ступінь крововтрати - 44%; на загальний холестерин в рівній мірі ступінь і термін крововтрати - по 16%, їх поєднане дію становить 24%; на тригліцериди поєднане дію ступеня і терміну крововтрати становить 22%.
критичний стан
крововтрата
ліпідний обмін.
1. Гончар-Зайкин П.П. Надбудова до Excel для статистичної оцінки та аналізу результатів польових і лабораторних дослідів / П.П. Гончар-Зайкин, В.Г. Чортів // Раціональне природокористування та сільськогосподарське виробництво в південних регіонах Російської Федерації. - М .: Сучасні зошити. - 2003. - C. 559-564.
2. Aleshin IA The nondrug treatment of hypertension patients by their adaptation to periodic hypoxia in a barochamber / IA Aleshin, II Kots, VP Tverdokhlib [et al.] // Ter. Arkh. - 1993. - № 65. - P. 23-29.
3. Bostrоm P. Hypoxia converts human macrophages into triglyceride-loaded foam cells / P. Boström, B. Magnusson, PA Svensson [et al.] // Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. - 2006. - Vol. 26. - P. 1871-1876.
4. Filipe P. Plasma lipoproteins as mediators of the oxidative stress induced by UV light in human skin: a review of biochemical and biophysical studies on mechanisms of apolipoprotein alteration, lipid peroxidation, and associated skin cell responses / P. Filipe, P. Morlière , JN Silva [et al.] // Oxid Med Cell Longev. - 2013. - Vol. 2013. - P. 285.
5. Kim, WY Failure to prolyl hydroxylate hypoxia-inducible factor alpha phenocopies VHL inactivation in vivo / WY Kim, M. Safran, MR Buckley [et al.] // EMBO J. - 2006. - № 25. - P. 4650 -4662.
6. Mylonis, I. Hypoxia causes triglyceride accumulation by HIF-1-mediated stimulation of lipin 1 expression / I. Mylonis, H. Sembongi, C. Befani [et al.] // J Cell Sci. - 2012. - Vol. 125. - P. 3485-3493.
7. Rankin EB Hypoxia-inducible factor 2 regulates hepatic lipid metabolism / EB Rankin, J. Rha, MA Selak [et al.] // Mol. Cell. Biol. - 2009. - Vol. 29. - P. 4527-4538.
8. Yonan T. Inhibition of cholesterol biosynthesis under hypoxia / T. Yonan, Qiulin T. // Submitted to the Office of Graduate Studies of Texas A & M University - 2005 - Vol. 1 - P. 1-26.
Сучасна клінічна класифікація крововтрати, яка використовується в практиці, заснована на залежності від об'єму циркулюючої крові (ОЦК): мала крововтрата - 5-10%, середня - від 10% до 30%, велика - від 30% до 40%, масивна - більше 40 %, смертельна - більше 70% ОЦК. Розрізняють декілька стадій гострої крововтрати: судинно-рефлекторна - перші 24 год; гідреміческой - другу добу; костномозговая - з 5-х діб постгеморагічного періоду. Наслідком гострої крововтрати є гіпоксія змішаного характеру, що поєднує наявність анемії, гиповолемию, порушення циркуляції і формування біонергетіческой гіпоксії. При крововтраті особливості метаболізму ліпідів не висуваються на перший план, хоча їх роль в механізмах адаптації, компенсації і пошкодження надзвичайно велика. Ідея про те, що клітини в стресовій ситуації, такий як кисневе голодування, здатні тимчасово реагувати анаболічними процесами, зокрема посиленням біосинтезу ліпідів, є новою. Мабуть, це спосіб збереження поживних речовин в організмі для подальшого використання в якості джерела енергії. Показано, що гіпоксія стимулює зберігання і пригнічує катаболізм ліпідів в культивованих кардіоміоцитах і макрофагах [3]. Одним з основних змін у відповідь на гіпоксію є HIF - опосередковане перепрограмування клітинного метаболізму. Индуцированная активація передачі сигналів HIF в гепатоцитах призводить до зміни ліпідного обміну і збільшує в них накопичення ліпідів [5, 7]. На жаль, є мала кількість робіт по впливу ступеня і терміну крововтрати на зміни ліпідного обміну і їх взаємодію в динаміці патологічного процесу.
Мета дослідження
Визначити вплив ступеня і терміну крововтрати на рівень тригліцеридів, фосфоліпідів, загального холестерину, холестерину в ліпопротеїнів.
матеріали та методи
Дослідження проведено на 98 лабораторних щурах масою 150-250 г. Гостру крововтрату здійснювали шляхом одномоментного забору крові за методикою Луценко (1961) в обсязі 0,5% від маси тіла (10% ОЦК); 1% від маси тіла (20% ОЦК); 2% від маси тіла (40% ОЦК). Згідно стадийности постгеморагічного періоду були визначені терміни дослідження - 24-й, 48-й, 72-й і 120-й год. У крові визначали: триацилгліцеридів (ензиматичний колориметрический метод, набори реагентів Ольвекс-діагностикум, Росія), загальний холестерин (ензиматичний колориметрический метод, набори реагентів фірми Ольвекс-діагностикум, Росія); холестерин в липопротеидах високої щільності (ензиматичний колориметрический метод, набори реагентів Ольвекс-діагностикум, Росія); фосфоліпіди (прямий ферментативний колорометріческій метод, набори реагентів фірми Sentinel, Італія); холестерин в липопротеидах дуже низької щільності і ліпопротеїдів низької щільності розраховували за формулою Friedewald WT Розрахунок індексу атерогенності (ІА) проводили за формулою А.І. Климова.
Математичні розрахунки виконані за допомогою програмного забезпечення StatSoft Inc. - Statistica for Windows, версія 8.0 і «майстер діаграм» Microsoft Excel 2007, пакет додатків AgCStat [1]. Для визначення достовірності відмінностей середніх величин застосовували критерій непараметричної статистики Манна-Уїтні (U). Достовірність розраховувалася з поправкою Бонферроні.
Результати дослідження та їх обговорення
Слід зазначити неоднозначне зміна рівня тригліцеридів (ТГ) в крові щодо контролю в постгеморрагіческій період. Зниження ТГ відзначається лише при 0,5% -ної крововтраті на 48-ту годину; при 1% -ній (24-й, 72-а година) і 2% -ної (72-а година) крововтраті їх вміст у крові зростає. Порівняльний аналіз динаміки ТГ в сироватці крові при крововтратах різного ступеня тяжкості показав, що спрямованість змін при 0,5% -ної і 1% -ної крововтратах в перші 24-48 год однакова, але відмінна при 2% -ної крововтраті. Після 0,5% -ної і 1% -ної крововтрати на 48-ту годину ТГ достовірно знижуються щодо 24-ої години, а при 2% -ної крововтраті є тенденція до їх підвищення. Найнижчий рівень ТГ відзначений на 48-ту годину постгеморагічного періоду при 0,5% -ної крововтраті, що може бути пов'язано з посиленням їх використання в стресовій ситуації на тлі слабо представленого гипоксического компонента. При 2% -ної крововтраті на 48-ту годину відзначаються найвищий рівень ТГ щодо інших видів крововтрат, можливо, через обмеження їх використання в умовах вираженої гіпоксії, так як переважним джерелом для енергозабезпечення клітин стає глюкоза за рахунок активації ключового ферменту гліколізу - фосфофруктокинази (ФФК), і, відповідно, зростання пропускної здатності реакції анаеробного гліколізу. Після 48 год крововтрати динаміка змін ТГ приблизно однакова (рис. 1). Зростання ТГ в крові на 72-й год незалежно від об'єму втраченої крові може бути наслідком наростання їх синтезу. Ряд авторів показав наявність зв'язку між HIF-1α, Ліпін-1 і особливістю метаболічного відповіді клітин на гіпоксію, яка призводить до зростання синтезу тригліцеридів і формування ліпідних крапель в клітинах [6].
Мал. 1. Тригліцериди при 0,5% -ної, 1% -ний і 2% -ної крововтраті
* - достовірність групи 0,5% -ної крововтрати до 1% -ної крововтраті; ^ - достовірність групи 0,5% -ної крововтрати до 2% -ної крововтраті; | - достовірність групи 1% -ної крововтрати до 2% -ної крововтраті; достовірність щодо контролю вказана в тексті
У клінічній практиці при корекції постгеморагічних ситуацій, в тому числі і метаболічних, слід враховувати не тільки ступінь, але і термін крововтрати, а також їх поєднане дію. Дисперсійний аналіз за оцінкою сили і достовірності впливу ступеня крововтрати, терміну постгеморагічного періоду на рівень ТГ показав, що найбільший вплив робить сума організованих факторів (ступінь крововтрати, термін крововтрати і їх взаємодія), в середньому - 32%; з них найбільша сила впливу належить сочетанному дії (взаємодії) маси і терміну крововтрати - 22%; вплив терміну постгеморагічного періоду - 8%.
Характер змін фосфоліпідів (ФЛ) залежний від ступеня крововтрати. При крововтраті в обсязі 0,5% від маси тіла ФО достовірно знижені на 24-й, 72-й і 120-й годинник щодо контрольних значень; навпаки, при інших ступенях крововтрати ФО поступово зростають і набувають достовірні відмінності від контролю: 1% на 72-ту годину; 2% на 48-й, 72-й год. Найбільш яскраві відмінності в змісті ФО і характер їх змін представлені на 72-й год - при 0,5% -ної крововтраті зареєстровані найнижчі значення ФО щодо контролю та інших видів крововтрат, при 1% -ної і 2% -ної - найвищі значення як щодо 0,5% -ної крововтрати, так і щодо контролю (рис. 2).
Мал. 2. Зміна рівня фосфоліпідів при 0,5%, 1% і 2% крововтраті
* - достовірність групи 0,5% -ної крововтрати до 1% -ної крововтраті; ^ - достовірність групи 0,5% -ної крововтрати до 2% -ної крововтраті; достовірність щодо контролю вказана в тексті
З одного боку, динаміка зміни ФЛ в крові може бути пов'язана з інтенсивністю вільнорадикальних процесів в організмі, з іншого - з адекватною реакцією збільшення їх синтезу, спрямованої на відновлення втрачених клітин крові. Дисперсійний аналіз показав, що найбільший вплив робить сума організованих факторів - 59%; з них основним фактором є ступінь крововтрати і становить в середньому 44%; на значення терміну крововтрати доводиться 5,2%, на поєднання їх дії - 9%.
Ступінь крововтрати впливає на кількісні показники загального холестерину (ОХ) в постгеморрагіческій період щодо контролю: при 0,5% ОХ достовірно нижче лише на 72-ту годину; при 1% -ної крововтраті ОХ достовірно вище на 24-ту годину і далі достовірно нижче на 72-12-й год; при 2% -ної крововтраті відзначено його достовірне підвищення на 24-й і 120-й год. Слід зазначити, що рівень ОХ на 24-ту годину при 0,5% -ної крововтраті нижче, ніж при 1% -ної і 2% -ної (рис. 3). Відмінності в динаміці кількісних змін ОХ залежно від маси втраченої крові найбільш яскраво проявляються на 72-120-а година: при 0,5% -ної і 1% -ної крововтраті рівень ОХ досягає або наближається до контрольних значень, а при 2% - ної крововтраті він продовжує зростати щодо контролю та інших ступенів крововтрати. Зниження загального холестерину в сироватці крові на тлі гіпоксії відзначено у пацієнтів з гіперхолестеринемією, що піддавалися періодичної гіпоксії в барокамері [2]. У роботах по впливу гіпоксії на біосинтез холестерину в клітинних культурах гепатоцитів доведено, що гіпоксія пригнічує експресію HMG-CoA-редуктази, наслідком чого є обмеження біосинтезу холестерину, і це розглядається як захисний механізм [8]. Але в той же час ряд авторів відзначає, що гіпоксія сприяє накопиченню холестерину головним чином в якості складного ефіру, в клітинах гладеньких м'язів, культивованих в гіперлепідеміческой сироватці [5].
Мал. 3. Загальний холестерин при 0,5% -ної, 1% -ний і 2% -ної крововтраті
* - достовірність групи 0,5% -ної крововтрати до 1% -ної крововтраті; ^ - достовірність групи 0,5% -ної крововтрати до 2% -ної крововтраті; | - достовірність групи 1% -ної крововтрати до 2% -ної крововтраті; достовірність щодо контролю вказана в тексті
Дисперсійний аналіз показав, що на динаміку і кількісне представництво ОХ в крові найбільше вплинула сума організованих факторів і становить 55,4%, вплив терміну крововтрати - 16%, ступеня крововтрати - 16%, їх поєднане дію - 24%.
Динаміка коефіцієнта атерогенності (КА) не відповідає динаміці змін ОХ в крові. Найбільш значимо КА змінювався щодо контролю при 0,5% -ної і 1% -ної крововтраті: достовірно збільшувався на 24-ту годину, знижувався на 48-ту годину, знову зростав на 72-ту годину і залишався вище контрольних значень на 120 а година при 0,5% -ної крововтраті. При 2% -ної крововтраті КА достовірно знижувався на 48-ту годину і зростав до 120-ї години. Відзначається односпрямоване зміна КА при 0,5% -ної і 1% -ної крововтраті, він вище щодо контролю і 2% -ної крововтрати на 48-72-й год. При 2% -ної крововтраті на тлі зростання ОХ коефіцієнт атерогенності зростає лише на 120-й год, в інші терміни дослідження або порівняти, або нижче контрольних значень (рис. 4).
Мал. 4. Динаміка коефіцієнта атерогенності при 0,5% -ної; 1% -ної і 2% -ної крововтраті
^ - достовірність групи 0,5% -ної крововтрати до 2% -ної крововтраті; | - достовірність групи 1% -ної крововтрати до 2% -ної крововтраті; достовірність щодо контролю вказана в тексті
Зміни КА обумовлені перерозподілом холестерину в ліпопротеїнів (рис. 5). При 0,5% -ної крововтраті зростання КА на 24-й, 72-й і 120-а година обумовлений достовірним зниженням Х-ЛПВЩ, при 1% -ної крововтраті КА на 24-й год і 72-й год зростає головним чином за рахунок достовірного перерозподілу в бік атерогенних ліпопротеїнів. При 2% -ної крововтраті КА до 120-ої години знижений або нормальний за рахунок достовірного зростання Х-ЛПВЩ, що може бути розцінено як компенсаторна реакція у відповідь на збільшення ОХ. На 120-ту годину коефіцієнт зростає за рахунок збільшення Х-ЛПДНЩ і Х-ЛПНЩ при зниженні Х-ЛПВЩ.
висновок
Отже, при крововтраті будь-якого ступеня тяжкості в постгеморрагическом періоді розвивається дислипидемия. Будь-яка крововтрата має проатерогенного властивостями. Найбільший вплив на зміну ліпідного профілю крові надає сума організованих факторів (таких як ступінь крововтрати, термін крововтрати і їх поєднане дію): для фосфоліпідів - 59%, для загального холестерину - 55%, для тригліцеридів - 32%. З них на фосфоліпіди в більшій мірі впливає ступінь крововтрати і становить 44%, на загальний холестерин в рівній мірі впливають ступінь і термін крововтрати - по 16%, на тригліцериди впливає поєднання ступеня і терміну крововтрати - 22%.
бібліографічна посилання
Нестеров М.І., Кривохижина Л.В., Єрмолаєва Е.Н., Кантюков С.А. ВПЛИВ СТУПЕНЯ І ТЕРМІНУ крововтрати НА РІВЕНЬ ТРИГЛІЦЕРИДІВ, ФОСФОЛІПІДІВ, ЗАГАЛЬНОГО ХОЛЕСТЕРИНУ, холестерину в ліпопротеїнів // Сучасні проблеми науки та освіти. - 2016. - № 6 .;
URL: http://www.science-education.ru/ru/article/view?id=25632 (дата звернення: 23.06.2019).
Пропонуємо вашій увазі журнали, що видаються у видавництві «Академія природознавства»
(Високий імпакт-фактор РИНЦ, тематика журналів охоплює всі наукові напрямки)
Ru/ru/article/view?
