1 Астахін А.В. 1 Евлашева О.О. 1 Левітан Б.Н. 1
1 ФГБОУ ВО "Астраханський ДМУ" МОЗ Росії
Проведено вивчення концентрації основного білка мієліну (ОБМ) і нейронспецифічна енолази (НСЕ) в сироватці крові у 84 хворих на хронічний гепатит (ХГ) (вірусної етіології HBV, HCV - 38; алкогольної етіології - 17; аутоімунний гепатит - 11; гепатит змішаної етіології - 18 ) і 77 цирозом печінки (ЦП) (вірусної етіології HBV, HCV, HBV + HCV - 27; первинний біліарний цироз - 10, алкогольної етіології - 18; змішаної етіології - 22). Контрольна група - 30 практично здорових осіб (донори). Концентрації ОБМ і НСЕ в сироватці крові визначали методом твердофазного імуноферментного аналізу з використанням комерційних тест-систем 449-5830 DSL МВР і 420-10 Fujirebio НСЕ. За результатами проведеного дослідження при алкогольних ураженнях печінки як на стадії ХГ, так і сформованого ЦП спостерігалося значне підвищення концентрації ОБМ крові в порівнянні з вірусними ураженнями. Концентрація НСЕ у хворих ЦП досліджуваних етіологічних груп, на відміну від ХГ, істотно не відрізнялася.
основний білок мієліну
нейронспецифічна енолаза
хронічний гепатит
цироз печінки
печінкова енцефалопатія.
1. Жукова І.А. Нейронспецифічна енолаза як неспецифічний маркер нейродегенеративне процесу / І.А. Жукова, В.М. Аліфірова, Н.Г. Жукова // Бюлетень сибірської медицини. - 2011. - Т. 10. - № 2. - С. 15-21.
2. Белопасов В.В. Клінічна диференціація печінкової енцефалопатії у хворих на цироз печінки / В.В. Белопасов, Р.І. Мухамедзянова, М.К. Андрєєв, Б.Н. Левітан // Вятський медичний вісник. - 2002. - № 1. - С. 46-47.
3. Івашкін В.Т. Захворювання печінки та печінкова енцефалопатія / В.Т. Івашкін, Ф.І. Комаров, І.О. Іваник // Російський медичний журнал. - 2001. - Т. 3. - № 12. - С. 150-155.
4. Левітан Б.Н. Хронічна патологія печінки і кишковий мікробіоценоз (клініко-патогенетичні аспекти) / Б.М. Левітан, А.Р. Умерова, М.М. Ларіна. - Астрахань: АГМА, 2010. - 135 с.
5. Левітан Б.Н. Зміни концентрації основного білка мієліну в сироватці крові при захворюваннях печінки / Б.М. Левітан, А.В. Астахін, О.О. Евлашева // Експериментальна і клінічна гастроентерологія. - 2015. - № 2. - С. 93.
6. Павлов Ч.С. Печінкова енцефалопатія: патогенез, клініка, діагностика, терапія / Ч.С. Павлов, І.В. Дамулін, В.Т. Івашкін // Російський журнал гастроентерології, гепатології, колопроктології. - 2016. - № 1. - С. 44-53.
7. Торопова Н.Є. Оцінка інформативності нейронспецифічна енолази, яка визначається імуноферментним методом / Н.Є. Торопова, Е.А. Дорофєєва, С.П. Дворянінова, Ж.П. Васіева // Клінічна лабораторна діагностика. - 1995. - № 1. - С. 15-17.
8. Чехонин В.П. Основний білок мієліну. Будова, властивості, функції, роль в діагностиці демієлінізуючих захворювань / В.П. Чехонин, О.І. Гуріна, Т.Б. Дмитрієва та співавт. // Біомедична хімія. - 2000. - Т. 46. - № 6. - С. 549-563.
9. Arguedas MR Influence of hepatic encephalopathy on healthy - related quality of life in patients with cirrhosis / MG Arguedas, TG Delawrence, BM Mcguire // Digestive diseases and sciences. - 2003. - V. 48. - P. 1622-1626.
10. Butterworth RF Pathophysiology of hepatic encephalopathy: The concept of synergism // Hepatol. Res. - 2008. - V. 38. - P. 116-121.
11. Isgro M. Neuron - specific enolase as a biomarker: biochemical and clinical aspects / M. Isgro, P. Bottoni, R. Scatena // AdvExp Mad Biol. - 2015. - Vol. 867. - P. 125-143.
12. Persson L. 100 protein and neuron-specific enolase in cerebrospinal fluid and serum: markers of cell damage in human central nervous system / L. Persson, HG Hardemark, J. Gustaffson et al. // Stroke. - 1987. - Vol. 18. - P. 911-918.
13. Rabinowicz A. NSE as a useful prognostic factor for patients after cerebral hypoxia / A. Rabinowicz, H. Reiber // Epilepsia. - 1996. - Vol. 37. - P. 122-125.
14. Tzakos A. Structure and function of the myelin proteins: current status and perspectives in relation to multiple sclerosis / A. Tzakos, A. Troganis, V. Theodorou // Curr. Med. Chem. - 2005. - Vol. 12. - P. 1569-1587.
Хронічний гепатит (ХГ) і цироз печінки (ЦП) є поліетіологічним захворюванням. Загальновідомо, що інфікування гепатотропними вірусами є основним етіологічним фактором, що призводить до розвитку ХГ, а зловживання алкоголем, в свою чергу, є другою основною причиною даної патології [3; 4].
Перебіг і прогноз захворювань печінки значною мірою визначається наявністю і ступенем вираженості ураження центральної нервової системи (ЦНС) [3]. Печінкова енцефалопатія (ПЕ) являє собою комплекс потенційно оборотних нервово-психічних порушень, обумовлених поразкою ЦНС токсичними речовинами, незнешкоджену патологічно зміненої печінкою, що виникають насамперед у результаті гострої або хронічної печінкової недостатності [2; 3; 6; 9; 10]. З огляду на крайню агресивність цих речовин, можна припустити, що під їх впливом відбувається деструкція нервової тканини з вивільненням в рідкі середовища організму продуктів її розпаду [8].
Вивченню діагностичної та прогностичної значимості таких маркерів нейродеструкціі, як основний білок мієліну (ОБМ) і нейронспецифічна енолаза (НСЕ), при різних патологічних станах ЦНС присвячено досить велику кількість досліджень [1; 5; 7; 8; 11-14]. У той же час питання про їх діагностичної цінності при хронічних дифузних захворюваннях печінки (ХДЗП) різної етіології залишається мало вивченим. У зв'язку з цим вивчення ОБМ і НСЕ в залежності від етіології ХДЗП є актуальним і перспективним.
Мета: вивчити діагностичну значущість визначення концентрації основного білка мієліну та нейронспецифічна енолази в сироватці крові в залежності від етіології ХДЗП.
Матеріали та методи. Для вирішення поставлених завдань за період з 2012 по 2014 р було обстежено 84 хворих ХГ (вірусної етіології HBV, HCV - 38; алкогольної етіології - 17; аутоімунний гепатит - 11; змішаної етіології - 18) і 77 ЦП (вірусної етіології HBV, HCV , HBV + HCV - 27; первинний біліарний цироз - 10, алкогольної етіології - 18; змішаної етіології - 22), які перебували на стаціонарному лікуванні в гастроентерологічному відділенні ГБУЗ АТ «АМОКБ». Серед обстежених хворих з патологією печінки була виділена група з 17 пацієнтів, яка не увійшла до складу хворих ХГ. Цю групу становили пацієнти з гострим алкогольним гепатитом (ОАД), що протікає з симптомами вираженої печінково-клітинної недостатності. Контрольну групу склали 30 практичних здорових осіб (донори).
Дослідження проводилися на основі власних спостережень і даних медичної документації (клінічна історія хвороби, амбулаторна карта, висновки фахівців з параклінічним методам обстеження).
Хворі надходили в клініку в стадії загострення основного захворювання. При постановці діагнозу використані загальноприйняті в даний час класифікації. Клінічний діагноз встановлювався на підставі скарг хворих, вивчення анамнезу, фізикальних даних, лабораторних та інструментальних методів дослідження. В анамнезі приділялася особлива увага оперативних втручань, гемотрансфузій, вживання алкоголю і внутрішньовенних наркотичних препаратів, тривалого застосування гепатотоксичних лікарських препаратів, наявності спадкових захворювань.
Критерії виключення: супутня патологія ЦНС, лікування препаратами, що володіють побічним нейротоксическим ефектом.
Концентрації ОБМ і НСЕ в сироватці крові визначали методом твердофазного імуноферментного аналізу за допомогою наборів реагентів комерційних тест-систем 449-5830 DSL МВР і 420-10 Fujirebio НСЕ.
Статистичну обробку даних виконували з використанням пакета прикладних програм Statistica 6.0. Для кількісного порівняння ознак двох незв'язаних груп застосовували параметричний критерій Стьюдента (t). Кореляційний аналіз з розрахунком коефіцієнта кореляції (r) проводили з використанням критерію Спірмена. Відмінності вважали статистично значущими при досягнутому рівні значимості p <0,05.
Результати та обговорення. Концентрація ОБМ у хворих ХГ вірусної етіології в середньому склала 1,9 ± 0,27 нг / мл, змішаної - 2,3 ± 0,3 нг / мл, аутоімунної 2,17 ± 0,19 нг / мл, що вірогідно не відрізнялося від результатів, отриманих в групі донорів - 1,9 ± 0,3 нг / мл (р> 0,05) (рис. 1). Більш значне підвищення рівня ОБМ було виявлено у хворих на хронічний гепатит алкогольної етіології, склавши 2,9 ± 0,39 нг / мл, що вірогідно перевищувало значення, отримані в контрольній групі, а також у хворих з вірусною етіологією захворювання (р <0,05 ). Максимальна концентрація ОБМ в сироватці крові була виявлена в групі хворих ОАД, склавши в середньому 5,4 ± 0,17 нг / мл, що вірогідно перевищувало показники, характерні як для здорових осіб, так і для хворих на хронічний гепатит вірусної, змішаної, аутоімунної і алкогольної етіології (р <0,05). У досліджуваній групі пацієнтів ОАД максимальна концентрація ОБМ в периферичної крові спостерігалася в 75% випадків.
Результати, отримані при дослідженні концентрації НСЕ у хворих ХГ і ОАД, дещо відрізнялися (рис. 2).
Концентрація НСЕ у хворих на хронічний гепатит вірусної етіології склала 6,9 ± 0,41 нг / мл, змішаної - 7,4 ± 0,37 нг / мл, аутоімунної - 6,4 ± 0,52 нг / мл. Отримані результати близькі і достовірно не відрізнялися від значень, отриманих в контрольній групі - 6,49 ± 0,41 нг / мл (р> 0,05).
Рівень НСЕ у хворих на хронічний гепатит алкогольної етіології в середньому склав 8,1 ± 0,51 нг / мл, що вірогідно вище, ніж у контрольній групі, а також у хворих на аутоімунний і ХГ вірусної етіології (р <0,05).
Найбільш значне підвищення концентрації НСЕ, так само як і ОБМ, було виявлено у хворих ОАД, склавши в середньому 14,3 ± 0,47 нг / мл, причому у 81% обстежених пацієнтів отримані результати істотно перевищували показники, характерні для донорів, а також хворих на хронічний гепатит вірусної, змішаної, аутоімунної і алкогольної етіології (р <0,05), досягаючи 25 нг / мл.
Мал. 1. Концентрація ОБМ у хворих ХГ в залежності від етіології:
1 - вірусний гепатит (HBV, HCV); 2 - аутоімунний гепатит; 3 - алкогольний гепатит;
4 - гепатит змішаної етіології; 5 - контроль
Мал. 2. Концентрація НСЕ у хворих ХГ в залежності від етіології:
1 - вірусний гепатит (HBV, HCV); 2 - аутоімунний гепатит; 3 - алкогольний гепатит;
4 - гепатит змішаної етіології; 5 - контроль
Висока концентрація в периферичної крові досліджуваних маркерів пошкодження нервової тканини, таких як ОБМ і НСЕ, виявлена нами при алкогольних ураженнях печінки, ймовірно, є проявом демиелинизирующих процесів, нерідко спостерігаються при даній патології. Виявлені закономірності свідчать на користь того, що причинами розвитку атрофічних змін головного мозку і пошкоджень нервових волокон (маркерами яких є ОБМ і НСЕ), часто зустрічаються у осіб, що зловживають алкоголем, є не тільки нейротоксический ефект етанолу і його метаболітів, а й такі фактори, як дисфункція печінки, порушення харчування, а також дефіцит вітамінів групи В і нікотинової кислоти.
Як вже говорилося вище, основним етіологічним фактором, що призводить до виникнення хронічних гепатитів, є Гепатотропная вірусна інфекція.
Показники концентрації ОБМ і НСЕ в сироватці крові хворих ХГ в залежності від виду гепатотропного вірусу (В і С) були близькі і достовірно не відрізнялися один від одного, а також від показників, отриманих в контролі (р> 0,05). Також не було виявлено суттєвих відмінностей концентрацій досліджуваних маркерів деструкції нервової тканини у хворих на ХГС з 1 генотипом і генотипом "не-1» (2 і 3а). Отже, рівень в периферичної крові досліджуваних нами показників не залежить від типу вірусів.
Звертає на себе увагу, що показники концентрації ОБМ і НСЕ у хворих ХГ вірусної і ХГ змішаної етіології (вірусної + алкогольної) істотно не відрізняються один від одного, а також від результатів, отриманих в контролі (р> 0,05). У той же час встановлено, що поєднання вірусного і алкогольного чинників надає більш істотний вплив на стан досліджуваних маркерів нейродеструкціі, ніж тільки при вірусної етіології. Так, якщо у хворих змішаної етіології рівень ОБМ в 42% випадків перевищував показники, характерні для здорових осіб, то при хронічних вірусних гепатитах лише в 30%. Концентрація НСЕ відповідно в 39% випадків перевищувала показники, характерні для здорових осіб при змішаній етіології захворювання, а при вірусної лише в 31%. На наш погляд, це побічно свідчить про те, що висока концентрація досліджуваних маркерів пошкодження нервової тканини, виявлений у частини хворих ХГ, більш характерна при наявності такого етіологічного фактора, як зловживання алкоголем.
Проведений в загальній групі хворих ХГ кореляційний аналіз значень ОБМ і НСЕ показав відсутність достовірних зв'язків між даними показниками. У той же час в групі хворих з алкогольними ураженнями печінки була виявлена позитивна слабкої сили кореляційний зв'язок між концентраціями ОБМ і НСЕ (r = 0,45), що, на наш погляд, побічно свідчить про близьких механізми, що приводять до підвищення рівня цих маркерів ушкодження нервової тканини при даній патології.
Виявлені закономірності дозволяють використовувати визначення рівня ОБМ і НСЕ в сироватці крові хворих ХГ в якості додаткового маркера при діагностиці різних етіологічних форм хронічного гепатиту, перш за все алкогольної етіології, а також для визначення того, чи демиелинизирующих процесів при даній патології.
З огляду на, що є етіологічні особливості характеру перебігу ЦП, темпів прогресування, розвитку ускладнень, було проведено вивчення концентрації ОБМ і НСЕ в залежності від етіології захворювання. У 27 хворих (35%) був діагностований ЦП вірусної етіології, у 18 (23%) - алкогольний, у 22 (29%) в анамнезі зловживання алкоголем і перенесений вірусний гепатит одночасно (змішана етіологія), у 10 хворих (13%) був діагностовано первинний біліарний цироз печінки. Концентрації ОБМ і НСЕ у хворих ЦП вірусної етіології склали 2,3 ± 0,42 і 8,2 ± 0,56 нг / мл, змішаної - 2,7 ± 0,34 і 7,8 ± 0,43 нг / мл, біліарної 3,2 ± 0,39 і 8,3 ± 0,39 нг / мл, алкогольної 3,4 ± 0,3 і 8,9 ± 044 нг / мл відповідно.
Середні значення концентрації НСЕ в групах хворих ЦП вірусної, біліарної та алкогольної етіології достовірно (р <0,05) перевищували показники в контрольній групі. У той же час були відсутні достовірні відмінності концентрацій НСЕ в периферичної крові в залежності від етіології ЦП. Результати проведеного дослідження свідчать, що на стадії ЦП, на відміну від ХГ, концентрація даного маркера нейродеструкціі в периферичної крові не пов'язана з етіологією захворювання.
Отже, на стадії сформованого ЦП причини, що зумовлюють підвищення рівня НСЕ в периферичної крові, дещо відрізняються від таких при гепатитах (ОАД, ХГ). Ймовірно, провідну роль відіграє нейротоксическое дію продуктів ендогенної інтоксикації, що циркулюють в крові при тяжкій дисфункції печінки, а не пряму дію етанолу і його метаболітів.
Крім того що НСЕ перш за все відноситься до внутрішньоклітинним ензимам центральної нервової системи і вважається одним з найбільш специфічних показників її пошкодження, в той же час існує п'ять молекулярних форм изоферментов НСЕ, які виявляються не тільки в нейронах, але і в нейроендокринних клітинах, скелетних м'язах, печінки , еритроцитах і тромбоцитах, і коливання її загального рівня можуть бути пов'язані безпосередньо з тяжкою дисфункцією печінки і розвитком різних ускладнень, характерних для ЦП.
Результати, отримані при дослідженні рівня ОБМ в периферичної крові хворих ЦП різної етіології, дещо відрізнялися.
Так, результати дослідження свідчать, що при ЦП біліарної (3,2 ± 0,39 нг / мл) і алкогольної (3,4 ± 0,3 нг / мл) етіології значення ОБМ достовірно підвищені в порівнянні з контрольною групою - 1,9 ± 0,3 нг / мл і хворими на цироз печінки вірусної етіології - 2,3 ± 0,42 нг / мл (р <0,05). При ЦП вірусної етіології рівень ОБМ був найнижчим, порівнянним з показниками, отриманими в контролі (р> 0,05). При ЦП змішаної етіології (2,7 ± 0,34 нг / мл) його рівень був дещо вищим, ніж при вірусної, і відповідно більше, ніж у контролі, але достовірних відмінностей при зіставленні отриманих результатів не виявлено (р> 0,05) . Незважаючи на достовірну різницю показників ОБМ крові у хворих ЦП алкогольної етіології і ПБЦ в порівнянні з контролем, достовірного відмінності в рівні досліджуваного білка між цими досліджуваними групами хворих ми не виявили (р> 0,05). Середні значення концентрації ОБМ в периферичної крові у хворих на цироз печінки змішаної і алкогольної етіології незначно відрізнялися один від одного: 2,7 ± 0,34 і 3,4 ± 0,3 нг / мл відповідно, достовірної відмінності виявлено не було (р> 0 , 05). Отримані результати представлені на рис. 3 і 4.
Мал. 3. Концентрація НСЕ у хворих ЦП в залежності від етіології: 1 - ЦП вірусної етіології (HBV, HCV); 2 - первинний біліарний цироз; 3 - ЦП алкогольної етіології; 4 - ЦП змішаної етіології; 5 - контроль
Мал. 4. Концентрація ОБМ у хворих ЦП в залежності від етіології: 1 - ЦП вірусної етіології (HBV, HCV); 2 - первинний біліарний цироз; 3 - ЦП алкогольної етіології; 4 - ЦП змішаної етіології; 5 - контроль
Таким чином, виявлені закономірності аналогічні результатам, отриманим у хворих ХГ, в групі яких максимальна концентрація ОБМ плазми так само спостерігалася при алкогольної етіології захворювання.
Висновок. При алкогольних ураженнях печінки, як на стадії ХГ, так і сформованого ЦП, спостерігається значне підвищення концентрації ОБМ крові в порівнянні з вірусними ураженнями, що підтверджує наше припущення про те, що, крім нейротоксического дії продуктів ендогенної інтоксикації, що циркулюють в крові при важких ураженнях печінки , істотну роль в процесах нейродеструкціі і демієлінізації нервових волокон грає прямий ушкоджує ефект етанолу і його метаболітів.
бібліографічна посилання
Астахін А.В., Евлашева О.О., Левітан Б.Н. ОСНОВНИЙ БІЛОК мієліну І нейронспецифічна енолаза СИРОВАТКИ КРОВІ ПРИ ЗАХВОРЮВАННЯХ ПЕЧІНКИ РІЗНОЇ ЕТІОЛОГІЇ // Сучасні проблеми науки та освіти. - 2017. - № 2 .;
URL: http://www.science-education.ru/ru/article/view?id=26162 (дата звернення: 20.06.2019).
Пропонуємо вашій увазі журнали, що видаються у видавництві «Академія природознавства»
(Високий імпакт-фактор РИНЦ, тематика журналів охоплює всі наукові напрямки)
Ru/ru/article/view?
