Фото - Луганский центр стоматологической имплантации

Уїдлива бактерія. Розповідь з перших вуст про те, як була відкрита Helicobacter pylori, що викликає гастрити і виразки шлунка - Проект Fleming

У це важко повірити, але до кінця XX століття, коли людство навчилося пересаджувати серця, лікарі ще не представляли природи захворювання, що супроводжував людей протягом всього шляху. Гастрити і виразки, якими страждали чи не всі жителі планети, так і залишалися невиліковними захворюваннями та мучили людей протягом усього життя, поки не приводили до смерті.

Проект Fleming розповідає історію австралійців, Баррі Джеймса Маршалла і Джона Робіна Уоррена, які своєю роботою змогли відсунути кортико-вісцеральну теорію, фактори неправильного харчування, підвищену кислотність шлунка на другий план і уявити гастрит типу В як патологію з інфекційним початком.

Проект Fleming розповідає історію австралійців, Баррі Джеймса Маршалла і Джона Робіна Уоррена, які своєю роботою змогли відсунути кортико-вісцеральну теорію, фактори неправильного харчування, підвищену кислотність шлунка на другий план і уявити гастрит типу В як патологію з інфекційним початком

Баррі Маршалл

Баррі Маршалл: Я почав своє навчання в якості лікаря-фахівця в 1978 році. У 1979 році я приступив до роботи в Royal Perth Hospital для того, щоб набути досвіду в області кардіології та проведення операцій на відкритому серці, які виконувалися в Перті тільки в цій лікарні ...

А в другій половині 1981 року збіг обставин привів мене до відділення гастроентерології. Саме там я зустрів Робіна Уоррена. Мені було рекомендовано виконувати клінічний проект щороку - це було частиною мого навчання. Я запитав у мого начальника, доктора Тома Уотерса, чи був проект по гастроентерології, який я міг би почати. Він сказав мені, що Робін Уоррен дав йому список пацієнтів, у яких в біопсіях шлунка були присутні вигнуті бактерії, і потрібен хтось, щоб спостерігати цих хворих і встановити, які у них були захворювання. Я був особливо зацікавлений, тому що в списку була жінка, яку я займався в своїй палаті, у якій була сильна біль в животі, але не встановлено діагноз. У розпачі ми направили її до психіатра і почали лікування антидепресантами через відсутність кращого лікування. І було тільки незвичайне особливість у вигляді почервоніння слизової шлунка і бактерії Робіна на біопсії.

Робін Уоррен: До шлункової мікрофлори ставилися зневажливо. У половини пацієнтів, які проходять гастроскопію з біопсією, виявляють бактеріальну колонізацію їх шлунка, примітну постійністю бактерій і пов'язаних з ними гістологічними змінами. Протягом останніх трьох років я спостерігав маленькі вигнуті і S-образні бацили в 135 зразках біопсій шлунка. Бактерії були тісно пов'язані з поверхневим епітелієм як всередині, так і між шлункових ямок - поверхня шлунка неоднорідна, і має ямки - поглиблення, в яких знаходяться клітини, що виробляють шлункові ферменти і соляну кислоту. Розподіл бактерій було суцільним, плямистим або вогнищевим. Їх було важко побачити при стандартній, рутинної забарвленні гематоксиліном і еозином, зате вони добре фарбує при використанні спеціального срібного методу по Warthin-Starry.

Спіралеподібні бацили на шлунковому епітелії при фарбуванні срібним методом

Я класифікував надані мені зразки біопсії шлунка відповідно до типу запалення, незалежно від інших особливостей: «відсутність запалення», «хронічний гастрит» (ХГ) і «активний хронічний гастрит» (АХГ). При ХГ спостерігалися більш дрібні круглі клітини, ніж зазвичай, в той час як АХГ характеризувався збільшенням кількості клітин, характерних для активного запалення, крім особливостей при ХГ. Незвичайним було й шукати запалення.

Нові бактерії були рідкістю при відсутності запалення. Бактерії часто виявлялися при ХГ, але як правило були нечисленними. Вигнуті бацили майже завжди присутні при АХГ, часто у великій кількості і росли між клітинами поверхневого епітелію. Морфологія цих бактерій і їх тісний зв'язок з будовою слизової оболонки відрізняється від різних інших бактерій, яких часто бачили в епітелії. На поверхні слизової оболонки був присутній нормальний шар слизового секрету. Коли цей шар був інтактен, омертвілі клітини поширювалися по нього, в той час як вигнуті бацили впритул розташовувалися під епітелієм.

Вигнуті бацили і пов'язані з ними гістологічні зміни могли бути присутніми в будь-якій частині шлунка, але вони систематично спостерігалися напередодні шлунка. Запалення без бактерій зустрічалося в слизовій оболонці поблизу вогнищевих уражень, таких як карцинома або виразкова хвороба. У таких випадках лейкоцити поширювалися по всій товщині прилеглої слизової, на відміну від поверхневої інфільтрації, пов'язаної з бактеріями.

Екстраординарними особливостями цих бактерій було те, що вони фактично невідомі клінічним лікарям, точно також як і патології, і що вони тісно пов'язані з лейкоцитарною реакцією, і що вони присутні приблизно в половині наших звичайних зразків біопсії шлунка в достатній кількості для їх виявлення при рутинному гістологічному дослідженні. Єдиний інший мікроорганізм, активно зростаючий в шлунку, який я виявив - Candida, яку іноді бачили на дні виразки.

Як виживають ці бактерії точно невідомо. Існує градієнт середовища від кислої в просвіті шлунка до майже нейтральною в судинах слизової оболонки. Бактерії ростуть в тісному контакті з епітелієм, імовірно поблизу нейтральної частини цього градієнта, і, ймовірно, захищені вищерозміщеної слизом.

Ідентифікація та клінічне значення цієї бактерії залишаються невизначеними. При світловій мікроскопії вони нагадують Campylobacter Jejuni. Шлунок не слід розглядати як стерильний орган без постійної мікрофлори. Бактерії, тісно пов'язані з активною формою гастриту і присутні в достатній кількості для того, щоб їх побачити за допомогою світлової мікроскопії, є причиною значної захворюваності диспепсическими хворобами. Ці організми повинні бути визначені, а значення їх вивчено.

Баррі Маршалл: Мене часто запитують, що змусило мене послухати Робіна і взятися з ним за дане дослідження. Очевидно, що було цікаво вивчити раніше неописані бактерії, що живуть в шлунку, наповненому кислотою.

Приблизно в цей час я дізнався про наукові публікації, що описують Campylobacter jejuni як недавно виявлену поширену причину гастроентериту і коліту, пов'язаних з харчовими продуктами. Таким чином, я побачив фотографії кампілобактерій і визначив, що організми Робіна виявилися на них дуже схожі.

Таким чином, я побачив фотографії кампілобактерій і визначив, що організми Робіна виявилися на них дуже схожі

Джон Робін Уоррен

Наведене вище опис S-образних бактерій напередодні шлунка викликало у мого колеги доктора Уоррена наступні питання: чому вони не були помічені раніше? вони є патогенами або просто комменсаламі в пошкодженій слизовій оболонці? чи є вони кампілобактеріями?

У 1938 році доктор Доенг досліджував 242 аутопсійного матеріалу шлунка і виявив "спірохети" в 43% біопсій, але не зробив ніяких висновків, оскільки аутолиз не дозволяв якісно оцінити більшість зразків. Фрідбург і Баррон 1940 року вивчили 35 зразків резецированного шлунка і після довгих пошуків виявили ті ж мікроорганізми в 37%. Oни прийшли до висновку, що бактерії колонізували тканину поблизу доброякісних або малігнізовавшіхся виразок як непатогенні опортуністи. Палмер в 1954 році досліджував 1140 зразків аспіраційних біопсій шлунка, не використавши при цьому забарвлення сріблом, тому не дивно, що він не знайшов «ніякої структури, яка може обгрунтовано вважатися спирохетой». Він прийшов до висновку, що шлункові "спірохети" є потрапляють через рот бактеріями, які розмножуються тільки на посмертних зразках або поблизу виразки. З тих пір спіральні бактерії рідко згадуються, крім як в якості цікавою знахідки, і навіть поява гастроскопіческом біопсії не допомогло їх виявити. Срібне фарбування не є стандартним для фарбування біопсійної препаратів слизової оболонки, тому бактерії були втрачені не врахували.

У інших ссавців спіральні шлункові бактерії були добре відомі і вважалися комменсаламі (наприклад, Доенг знайшов їх у всіх з досліджуваних сорока трьох мавп). Вони зазвичай мають більше двох спіралей і населяють дно шлунка, секретується кислоту. У кішок вони навіть займають канали парієтальних клітин, що свідчить про їх толерантності до кислоті. Ці бактерії у тварин не викликають ніякої запальної реакції, і немає хвороби, яка асоціювалася б з ними. Дослідження цих же бактерій у людини сформувало помилкове припущення про те, що бактерії були такими ж, як у тварин, кислотостійкими мешканцями дна шлунка. Однак бактерії Уоррена коротше, мають тільки одну або дві спіралі і нагадували кампілобактерії, а не спірохети. Вони жили під слизом передодня шлунка далеко від кіслотопродуцірующей клітин

Ми культивували бактерії із зразків антральной біопсії, використовуючи методики ізоляції кампілобактерій. Вони і росли на сиром шоколадному агарі при температурі 37 ° С при мінімальній кількості кисню, проявляючись протягом 3-4 днів у вигляді слабкого прозорого шару. Вони були близько 0-1 мкм в діаметрі і 2-5 мкм в довжину, представляли собою короткі спіралі з одним або двома завитками. У бактерій була гладка оболонка з оболонкових джгутиками з одного кінця, в кількості до п'яти штук. У деяких клітинах, включаючи подільні форми, джгутики могли бути видно з обох кінців, і в препаратах з негативним забарвленням мали опуклі кінчики, мабуть артефакт. Ці бактерії не підходили ні до одного з відомих видів ні морфологічно, ні біохімічно.

Ці бактерії не підходили ні до одного з відомих видів ні морфологічно, ні біохімічно

Електронна мікроскопія з негативним забарвленням ділиться бактерії з культури

Патогенність цих бактерій залишалася недоведеною, але були підозри щодо їх зв'язку з поліморфноядерних інфільтрацією предверрія шлунка у людини. Якщо ці бактерії дійсно були пов'язані з гастритом, як описав Уоррен, вони могли брати участь в інших погано вивчених, пов'язаних з гастритом захворюваннях (таких як виразкова хвороба і рак шлунка).

Озираючись назад, можна сказати що одним з переваг цього дослідження в Перті було те, що в сучасному західному суспільстві вже в 1981 році інфікування H. Pylori скоротилося: замість 80% осіб, що мають CLO (кампилобактер-подібні організми, так їх назвав Уоррен - прим . автора), бактерії присутні тільки у 30 - 50%. Таким чином, в будь-який з колекцій біопсій, взятих в цьому році, Робін міг бачити зразки як інфікованих і з запаленням, так і неінфіковані, тобто сформувалася «контрольна група».

Я взяв на себе роботу, яка неадекватно оплачувалася протягом багатьох років. Поки мої сучасники будували свою кар'єру і домагалися успіху, я, здавалося, йшов далеко позаду.

У жовтні 1982 роки я представив попередні результати з нашого дослідження в місцевому коледжі лікарів і отримав неоднозначну реакцію. Я дізнався, що мій контракт в Royal Perth в наступному році відновлений не буде. Я успішно закінчив своє навчання в якості лікаря і тепер хотів працювати в напрямку гастроентерології або мікробіології, щоб продовжити дослідницьку роботу. Таких робочих місць в Royal Perth не було.

Втрутилася фортуна, коли я звернувся до лікарів Норму Мариновичу і Іану Хіслоп з Fremantle Hospital, які запропонували мені керівну посаду і фінансування дослідження. У наступні два роки у Фрімантл у мене була захоплена група людей, які працюють зі мною. Єдиним недоліком призначення було те, що я був змушений припинити свою співпрацю з Робіном Уорреном. Тут для Робіна не було посади лікаря-патологоанатома.

Це були щасливі і дуже продуктивні роки. Я зміг дуже швидко підтвердити, що виявлені бактерії в Royal Perth Hospital також спостерігалися і в інших частинах міста, більшість хворих на виразкову хворобу мали мікроорганізм. Саме у Фрімантле за ці два роки були розроблені перші ефективні методи лікування. Я розгадав загадку, чому вісмут був таким ефективним засобом для лікування шлунку протягом останніх 200 років. Я провів свій знаменитий експеримент на собі після чого були розроблені перші уреазний тест.

Великим успіхом було знайти доктора Мартіна Скірроу на початку 1983 року в Великобританії. У вересні 1983 року в лазареті Вустера я відвідав ендоскопічну сесію, якою керували Мартін Скірроу і Кліодна Макналті, де вдалося успішно ізолювати мікроорганізм, показавши, що спіральна бактерія була не просто австралійським феноменом, а була присутня у пацієнтів з виразковою хворобою і в Великобританії.

Таким чином, в 1984 році існувало кілька груп по всьому світу, які проводили дослідження паралельно нашій групі в Перті. Європейська група дослідників влаштувалася з людей, яких я зустрів в Брюсселі в 1983 році (на другому міжнародному робочій нараді з вивчення кампілобактеріозной інфекції, де Маршалл вперше представив свої результати - прим. Автора), і на сьогоднішній день я вважаю членів цієї групи моїми найближчими друзями. Ми розділили цю чудову історію разом.

Але 1984 рік виявився важким. Я безуспішно намагався заразити тварини моделі. Незважаючи на те, що з боку були виявлені невеликі інтерес і підтримка, велика частина моєї роботи була відхилена від публікації, і навіть прийняті документи значно затримувалися на розгляді. Мене зустрічали постійною критикою, стверджували що мої висновки були передчасними і не мали під собою серйозних обґрунтувань. Часто висловлювалася думка, що ніхто не зміг повторити мої результати. Це не відповідало дійсності, але стало частиною історії того періоду. Мені заявляли, що бактерії були або контоменантами, або нешкідливими комменсаламі.

У той же час я успішно лікував пацієнтів, які страждають небезпечною для життя на виразкову хворобу протягом багатьох років, за допомогою експериментального лікування. Деякі з моїх пацієнтів відкладали операцію, яка ставала непотрібною після простого 2-х тижневого курсу антибіотиків і вісмуту. Я висунув гіпотезу про те, що ці бактерії були причиною виразкової хвороби і значного ризику розвитку раку шлунка. Якщо я мав рацію, то в лікуванні виразкової хвороби це буде революцією ...

Наростало розчарування в зв'язку з негативною реакцією на мою роботу, і я зрозумів, що повинен відмовитися від тваринної моделі, і вирішив використовувати в якості піддослідного себе. Багато було написано про цей епізод, і я, звичайно, поняття не мав, що він стане таким важливим. Я насправді не очікував стати хворим настільки, наскільки це сталося. Я не обговорював експеримент з етичним комітетом в лікарні. Це був один з тих випадків, коли було б легше отримати прощення, ніж дозвіл. Тяжкістю інфекції я був захоплений зненацька. Коли я прийшов додому з результатами моєї біопсії, що показують колонізацію і класичне гістологічне пошкодження мого шлунка, Адрієнн (дружина Маршалла - прим. Автора) припустила, що настав час для самолікування (потім Маршалл продемонстрував успішне лікування своєї недуги за допомогою 14-денного курсу лікування метронідазолом і солями вісмуту - прим. автора). У мене сталося успішне інфікування, я довів свою точку зору.

В кінці 1984 року медичний дослідницька рада Австралії профінансував мої дослідження для проведення проспективного подвійного сліпого дослідження, щоб з'ясувати, чи можуть антибіотики вилікувати виразку дванадцятипалої кишки.

Незважаючи на те, що офіційно з Робіном я не співпрацював, в період моєї роботи у Фрімантле в 1983-1984 рр. ми зустрічалися, щоб обговорити статті для Lancet за обідом з нашими дружинами. У нас був один з таких обідів через кілька тижнів після мого самостійного експерименту. Я був в захваті від результатів і серйозності моєї хвороби. Це було перше підтвердження інфекції з документально зафіксованими результатами. Я поділився новиною з Робом, і він виявився настільки ж схвильований. На наступний день о 5 годині ранку Робу подзвонив журналіст з США. Коли він поставив йому просте запитання: «Ви впевнені, що це збудник, а не нешкідливий синантроп?», - Роб проговорився про результати моєї ще невиданої роботи: «Я знаю, тому що Баррі Маршалл просто заразився і мало не помер»; невелике перебільшення, але це хороший матеріал для статті. Він не знав, що журналіст був з газети «Зірка», обкладинка якої часто відрізняється розповідями про інопланетних дітей, усиновлених Ненсі Рейган. Це був їх коник. На наступний день з'явилася стаття під заголовком, «лікар морських свинок виявляє нові ліки від виразки і її причину».

Це стало одним з найщасливіших моментів в моєму житті і я дякую за це Роба. По-перше, у мене був безперервний потік пацієнтів в США, які прочитали цю статтю відчайдушно потребує лікування. І я був в змозі допомогти. Я лікував пацієнтів за дорученням в США ще в 1984 році.

По-друге, статтю прочитав Майк Манхарт, мікробіолог, який працював в The Procter & Gamble Company (The P & G Company - американська компанія, що спеціалізується на споживчих товарах - прим. Автора). Він відстежив опубліковані мною листи і розгледів економічний потенціал для P & G, яка потім створила препарат вісмуту і налагодила ділові стосунки. Пізніше P & G запатентувала більшу частину моєї роботи, а також допомогла мені з патентами на мої методи діагностики. Ми здійснювали невеликі вкладення протягом перших 10 років, але після 1995 року компанія стала для нас значним джерелом доходу. Десять років, проведені в університеті Вірджинії, дали мені шанс розширити своє дослідження, зокрема, в області лікування і діагностики. У мене був безперервний потік листів від пацієнтів, які після лікування звільнилися від життя, що складається з болю і руйнування.

Пацієнти часто хотіли внести пожертвування для подальшої роботи, тому я створив фонд, щоб використовувати ці гроші для освіти пацієнтів і лікарів в області мого дослідження. Одного разу історія про лікування Опубліковано в недільній газеті, яка видавалася на всій території США. У наступні тижні ми отримали 30000 листів і все з пожертвами на долар або два, для оплати за пересилання поштою і фотокопіювання інформації.

Протягом багатьох років журналісти, що висвітлювали цю історію, значно допомогли в освіті громадськості, щоб остання могла попросити, а потім вимагати нових методів лікування від лікарів, які не бажають їх визнавати.

Хвиля прийняття стала формуватися на початку 1990-х років, і до 1992 року, йдучи на конференцію, я отримав схвалення стільки ж, скільки і критики. 1994 рік став для нас переломним. У лютому 1994 року Національний інститут здоров'я провів нараду у Вашингтоні, округ Колумбія, яке закінчилося через 2 дня заявою про те, що ключем до лікування виразки шлунка і дванадцятипалої кишки стало виявлення і ліквідація Helicobacter Pylori. Я десять років чекав цього дня і відчував поєднання полегшення і задоволення від того, що я досяг своєї мети. Багато років тому я висунув гіпотезу, перевірив її і довів, і тепер вона отримала офіційне визнання.

Наступного року стало складніше. У лікарні я все ще мав повне навантаження у вигляді спостереження за пацієнтами в рамках дослідження, але одночасно я почав отримувати нагороди і визнання. Я був цим незадоволений. Велика частина мого часу витрачалася на відвідування зустрічей і подорожі ... Я був настільки залучений в експоненціальне зростання інтересу бактерією, що не мав можливості освіжити свої знання в нових областях молекулярної біології, які на той час представляли значну частку публікацій про Helicobacter.

Також моєю основною роботою було співробітництво з Tri-Med (американська компанія, що займається розробкою і виробництвом діагностичного обладнання - прим. Автора) у випробуваннях дихальних тестів і у врегулюванні питань з FDA. Я пишаюся своїми діагностичними тестами CLOtest і PYtest. Вони часто стають моїми забутими дітьми, яких затьмарили мої роботи по лікуванню. Надійні, дешеві й доступні методи діагностики так само важливі в медицині, як і методи лікування. Але вони не завжди отримують таке ж визнання

***

У 2005 році Нобелівська премія з фізіології та медицини пішла в руки гідних і самовідданих австралійських вчених - Баррі Джеймсу Маршаллу і Джону Робіну Уоррену.

«Я повинен розділити її і святкувати з тими, хто брав участь в первісної роботі в лікарнях в Перті і Фрімантле. Я продовжую жити в Перті в західній Австралії (де донині Маршалл є професором клінічної мікробіології університету західної Австралії - прим. Автора).

Часто траплялося, що удача відігравала визначальну роль в моєму житті: зустріч з Уорен, з першої культурою бактерій, а також випадкові зустрічі з багатьма людьми, які допомагали мені і співпрацювали зі мною. Я озираюся назад і я вдячний багатьом друзям, родині, які йшли зі мною разом по життєвому шляху, але найголовніші з них - моя дружина Адрієнн, мої діти і мої внуки ».


Если ви нашли помилки, відiлiть ее ведмедика та натісніть Ctrl + Enter

Вони є патогенами або просто комменсаламі в пошкодженій слизовій оболонці?
И є вони кампілобактеріями?
Коли він поставив йому просте запитання: «Ви впевнені, що це збудник, а не нешкідливий синантроп?

  • Зуботехническая лаборатория

    Детали
  • Лечение, отбеливание и удаление зубов

    Детали
  • Исправление прикуса. Детская стоматология

    Детали